Hyperactive pA-Tn5 Transposase for CUT&Tag（ DNA蛋白質互作 ）
產品名稱： Hyperactive pA-Tn5 Transposase for CUT&Tag（ DNA蛋白質互作 ）
英文名稱： Hyperactive pA-Tn5 Transposase for CUT&Tag
產品編號： S603
產品價格： 0
產品產地： 南京
品牌商標： Vazyme
更新時間： 2023-09-20T18:40:31
使用范圍： null
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操作簡單：可一步實現DNA的片段化和接頭連接，僅需9 h即可實現從細胞到二代測序文庫的轉化
超高活性：兼具Protein A&Tn5活性，DN**段化活性極高
細胞起始量低：可兼容低至60個細胞，甚至單細胞
純度高：蛋白純度高、核酸殘留低
應用于CUT&Tag技術
CUT&Tag（ Cleavage Under Targets and Tagmentation）是替換傳統的ChIP-Seq用以研究蛋白質-基因組互作的新技術，與后者相比，它具有顯著優勢，如：信噪比高，可重復性好，實驗周期短（1天實現從細胞到文庫構建），細胞投入量低等，因此，該方法適用于表觀遺傳學、腫瘤、干細胞等研究領域。?
CUT&Tag技術的實驗流程簡單，主要包括：①收集細胞；②分別孵育一抗和二抗；③孵育經過Hyperactive??pA/pG-Tn5 Transposase for CUT&Tag （#S603/S602）制備的轉座子；④激活轉座子，進行DN**段化； ⑤DNA提?。?⑥文庫擴增與純化。
活性檢測
如圖所示，對使用#S603反應體系（2 μg和10 μg體系）生成的轉座子進行活性檢測，針對不同的DNA投入量（50 ng和100 ng），1 μl轉座子可快速（10 min）實現DN**段化，說明該融合酶活性很高。
Hyperactive??pA-Tn5 Transposase for CUT&Tag是將Protein A與經過工程學改造的超高活性Tn5轉座酶進行融合，形成同時具備轉座酶與Protein A活性的新型融合酶，專門適用于蛋白質-基因組互作研究的CUT&Tag技術。與傳統的蛋白質-基因組互作研究方法ChIP-Seq相比，CUT&Tag具有顯著優勢，該技術實驗周期短，信噪比高，可重復性好，且細胞投入量低，尤其適用于早期胚胎發育、干細胞、腫瘤以及表觀遺傳學等研究領域。
| 組分 | S603-01 (10 μg) | S603-02 (20 μg) |
| Hyperactive??pA-Tn5 Transposase ( 500ng/μl)a | 20 μl | 40 μl |
| 5 × Tagment Buffer Lb | 250 μl | 500 μl |
| Coupling Buffer | 250 μl | 500 μl |
| Annealing Buffer | 500 μl | 1 ml |
a. #S603的質量濃度是500 ng/μl，換算成摩爾濃度是7.5 pmol/μl；
b. 5 × Tagment Buffer L含Mg2+，用于測試制備的轉座子片段化DNA的效果，而非CUT&Tag工作Buffer。
整個試劑盒于-85 ~ -65℃保存，干冰運輸；收到貨后Hyperactive??pA-Tn5 Transposase于-85 ~ -65℃保存，其余組分可于-30 ~ -15℃保存；生成的轉座子于-30 ~ -15℃保存，有效期一年。