武漢樞密腦科學技術有限公司
- 聯系人 :
- 地址 : 武漢市東湖高新技術開發區光谷七路128號 中科開物產業園樞密腦科學技術有限公司
- 郵編 : 430074
- 所在區域 : 湖北
- 電話 : 181****1572 點擊查看
- 傳真 : 點擊查看
- 郵箱 : marketing@brainvta.com
細胞周期
細胞周期-PI染色
? ? ??細胞周期(cell cycle）是指細胞從一次分裂完成開始到下一次分裂結束所經歷的全過程，分為間期與分裂期兩個階段。細胞周期反應了細胞增殖速度。PI(碘化丙錠):可以與細胞內DNA和RNA結合，采用RNA酶將RNA消化后，通過流式細胞術檢測到的與DNA結合的PI的熒光強度直接反映了細胞內DNA含量的多少。
? ? ? 細胞周期各時相的DNA含量不同：?
? ? ? ? ? ??G0/G1期具有二倍體細胞的DNA含量(2N)；
? ? ? ? ? ??G2/ M期具有四倍體細胞的DNA含量(4N)；
? ? ? ? ? ??S期的DNA含量介于二倍體和四倍體之間(2N-4N)。
實驗步驟：
DAY1
? ? ? 制備單細胞懸液，加到六孔板，10x104 cells/孔
DAY2
? ? ? 加藥處理12小時，每組3復孔
DAY3
? ? ??收集細胞，用預冷的PBS洗一次；
? ? ? 預冷的70%乙醇（PBS配制）重懸，放在4 度固定過夜（可以放在-20長期保存）。
DAY4
? ? ??配制染色液；
? ? ??固定好的細胞1000g離心5min；
? ? ? 預冷的PBS洗一次；
? ? ??染色液重懸細胞，37℃孵育 30min；
? ? ? 4 度保存，當日流式檢測，488nm激發波長。
