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一、番紅固綠詳情介紹： 1.植物番紅固綠染色：植物染色有多種染色方式，其操作流程和動物染色類似。番紅O-固綠染色多用于軟骨的染色，有時也可用于植物染色，木化、栓化和角質(zhì)的細(xì)胞被番紅染成鮮紅色，纖維素的細(xì)胞壁被固綠染成綠色。固綠是一種酸性染料，可將纖維素的細(xì)胞壁和細(xì)胞質(zhì)染成藍(lán)綠色，該染液染色速度快，通常10-30s即可，不易褪色。 2.骨番紅固綠染色：番紅O是一種結(jié)合多陰離子的陽離子染料，其顯示軟骨組織是基于陽離子染料與多糖中陰離子基團(tuán)（硫酸軟骨素或硫酸角質(zhì)素）結(jié)合，嗜堿性的軟骨與堿性的染料番紅結(jié)合呈紅色。番紅O著色與陰離子的濃度近似成正比關(guān)系，間接反映了基質(zhì)中蛋白多糖的含量和分布。當(dāng)軟骨受到損傷時，軟骨中的糖蛋白會釋放出來，使基質(zhì)成分分布不均勻，從而導(dǎo)致番紅O 淡染或不著色。嗜酸性染料的固綠與軟骨下骨膠原纖維結(jié)合，不宜褪色。番紅O-固綠染色的分化很關(guān)鍵，分化過度易導(dǎo)致切片不著色，分化不足易導(dǎo)致切片著色過深。 二、實(shí)驗(yàn)流程： 植物番紅固綠實(shí)驗(yàn)步驟： 1.石蠟切片脫蠟至水：依次將切片放入二甲苯Ⅰ8min-二甲苯Ⅱ8min-無水乙醇Ⅰ 6min-無水乙醇Ⅱ6min-95%酒精 6min-85%酒精 6min-75%酒精 5min-流水沖洗； 2.蒸餾水水洗2次，5min/次； 3.滴加番紅染液染色45min左右，室溫； 4.自來水水洗，洗去多余染料； 5.入90%酒精分化至組織附著的染料退去； 6.滴加固綠染液染色10-30s； 7.無水乙醇洗去多余染料，鏡下觀察番紅與固綠著色情況； 8.入1:1二甲苯無水乙醇混合溶液2min，至載玻片透明； 9.入二甲苯Ⅰ5min，二甲苯Ⅱ5min，二甲苯Ⅲ5min； 10.中性樹膠封片。 骨組織番紅固綠實(shí)驗(yàn)步驟： 1.石蠟切片脫蠟至水：依次將切片放入二甲苯Ⅰ8min-二甲苯Ⅱ8min-無水乙醇Ⅰ 6min-無水乙醇Ⅱ6min-95%酒精 6min-85%酒精 6min-75%酒精 5min-流水沖洗； 2.固綠染色3-5min，水洗去多余染液，至軟骨呈無色； 3.番紅染色1-2min，水洗去多余染液； 4.1% 醋酸分化，水洗； 5.95%酒精、無水乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹脂封片。 四、結(jié)果判讀：(1)植物番紅固綠結(jié)果判讀：木質(zhì)化的細(xì)胞壁及核呈紅色，薄壁細(xì)胞、細(xì)胞質(zhì)呈綠色。 （2）骨組織番紅固綠結(jié)果判讀：軟骨基質(zhì)深紅色，細(xì)胞漿、肌肉、膠原纖維及骨組織呈灰綠色。