RIPA裂解液
產品名稱： RIPA裂解液
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產品編號： C1053-500
產品價格： 0
產品產地： 中國
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RIPA裂解液?(RIPA?Lysis Buffer) ????C1053
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描述：?RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)對動物細胞胞膜、胞漿、胞核成分均有較強裂解作用，是經典和最常用的細胞組織快速裂解液。使用RIPA?裂解緩沖液制備用于Western特別是用于免疫共沉淀的裂解產物已經是一種首選的標準操作，也適用于大部分抗原表位檢測，特別是免疫共沉淀等實驗。
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組成：?100 ml??RIPA裂解緩沖液。
成分：50 mM Tris-HCl (pH 7.4), 150 mM NaCl, 1% NP-40, 0.1% SDS.
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儲存：4?℃保存 ?12個月有效
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制備細胞裂解產物：
1.?800g ?4℃離心5分鐘收集培養細胞，估計細胞離心后的體積（PCV,?106?cells=~20?ml, 107?cells =~100?ml?PCV）；
2.?每50～100?ml PCV加入5倍體積RIPA裂解緩沖液（250~500?ml）,冰浴放置10分鐘，并每隔5分鐘在漩渦混合儀上振蕩30秒；
3.?12000g ?4℃離心10分鐘，將上清轉移到新的離心管中，即得細胞總蛋白產物。
注意：如所得蛋白產物較為粘稠，可先95℃加熱5分鐘，迅速冰浴5分鐘，再進行步驟3
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制備組織裂解產物：
1.?取50-100?mg組織在冰上剪成碎片，用預冷的PBS洗滌2次離心棄去PBS；
2.?加入?0.5-1 ml?預冷?RIPA?裂解緩沖液；
3.?4℃用玻璃勻漿器勻漿20-40次，直到95％的細胞被破碎，然后在冰浴中放置10分鐘，并每隔5分鐘在漩渦混合儀上振蕩30秒；
4.?12000g ?4℃離心10分鐘，將上清轉移到新的離心管中，即得組織總蛋白產物。
注意：如所得蛋白產物較為粘稠，可先95℃加熱5分鐘，迅速冰浴5分鐘，再進行步驟4
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說明：?
1.?轉移上清液時不要吸入底部的沉淀物；
2.?在做免疫沉淀或免疫共沉淀時最好在實驗前進行蛋白提取，避免某些不穩定蛋白的降解；
3.?RIPA裂解緩沖液中未加入蛋白酶抑制劑，用戶可自行選擇添加。
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使用我司RIPA裂解緩沖液發表SCI論文已達數百篇，部分文章列表如下，供參考：
1、Corporation H P. Secernin-1 Contributes to Colon Cancer Progression through Enhancing Matrix Metalloproteinase-2/9 Exocytosis.[J]. Disease Markers, 2015.
2、Corporation H P. Cytotoxic Effects of Biosynthesized Zinc Oxide Nanoparticles on Murine Cell Lines[J]. Evidence-based Complementary and Alternative Medicine : ECAM, 2015, 2015.
3、Corporation H P. Protective effects of N-acetylcysteine in concanavalin a-induced hepatitis in mice.[J]. Mediators Inflamm, 2015.
4、Corporation H P. Blockade of lysosomal acid ceramidase induces GluN2B-dependent Tau phosphorylation in rat hippocampal slices.[J]. Neural Plasticity, 2014,
5、J. V, T. P, Y. L, et al. Androgen Receptor Activation[J]. Cellular Physiology & Biochemistry, 2014, 33(6):1911-1920.
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