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　　?蛋白酶k產(chǎn)品說明:凍干粉,無DNase和RNsse活性.4℃保存可存放2年以上.配置后的貯存液4℃保存可達1年之久.蛋白酶K是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶,對多種高分子量變性蛋白和天然蛋白有很強的蛋白水解活性.因為其可以快速對內(nèi)切核酸酶的水解鈍化作用而被常用于mRNA和高分子DNA的分離提取實驗中.蛋白酶K能被DFP,Hg2+,和PMSF抑制,不能被金屬螯合劑,巰基試劑,TLCK或TPCK活化

　　
蛋白酶k是一種枯草蛋白酶類的高活性蛋白酶，用于生物樣品中蛋白質(zhì)的一般降解。從林伯氏白色念球菌(tritirachium album limber)中純化得到。

　　蛋白酶k是一種枯草蛋白酶類的高活性蛋白酶，用于生物樣品中蛋白質(zhì)的一般降解。從林伯氏白色念球菌(tritirachium album limber)中純化得到。據(jù)資料顯示：該酶有兩個ca2+結(jié)合位點，它們離酶的活性中心有一定距離，與催化機理并無直接關(guān)系。然而，如果從該酶中除去ca2+，由于出現(xiàn)遠程的結(jié)構(gòu)變化，催化活性將喪失80%左右，但其剩余活性通常已足以降解在一般情況下污染酸制品的蛋白質(zhì)。所以，蛋白酶k消化過程中通常加入edta(以抑制依賴于mg2+的核酸酶的作用)。但是，如果要消化對蛋白酶k具有較強耐性的蛋白，如角蛋白一類，則可能需要使用含有1mmol/l ca2+而不含edta的緩沖液。在消化完畢后、純化核酸前要加入EGTA(ph8.0)至終濃度為2mmol/l,以鰲合ca2+。

　　蛋白酶K，是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。此酶經(jīng)純化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于蛋白酶K在尿素和SDS中穩(wěn)定，還具有降解天然蛋白質(zhì)的能力，因而它應用很廣泛，包括制備脈沖電泳的染色體DNA，蛋白質(zhì)印跡以及去除DNA和RNA制備中的核酸酶。蛋白酶K的一般工作濃度是50—100μg/ml。在較廣的pH范圍內(nèi)(pH 4-12.5)均有活性。

推薦反應緩沖液：50mMTris-HCl(pH7.5),10mM CaCl2 。

　　蛋白酶K配制標準：20mg/ml蛋白酶K配制標準(proteinase K)：將200mg的蛋白酶K加入到9.5ml水中，輕輕搖動，直至蛋白酶K完全溶解。不要渦旋混合。加水定容到10ml，然后分裝成小份貯存于-20℃。

保存：保存在-20℃冰箱里，避免反復凍融，有效保證12月。

孵育溫度為55至65℃，理想孵育溫度為58℃，孵育時間為15分鐘至48小時;理想孵育時間為2小時。

蛋白酶K proteinase K

蛋白酶K proteinase K

蛋白酶K proteinase K

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