? 葡聚糖Cross Link Dextran

固定金屬離子

（1）金屬離子的固定必須用過濾好的金屬離子溶液，以防止金屬鹽在介質上沉淀。

（2）用2-5倍柱床體積的蒸餾水充分平衡柱子。

（3）選擇合適的金屬離子（Cu2+，Zn2+，Ni2+，Co2+，Fe3+等），溶解在中性或弱酸性的溶液中，濃度為0.1~0.3M。如果是Fe3+必須在低pH下螯合（pH 3），以防止Fe3+產生沉淀。

（4）用2-5個柱床體積的金屬離子溶液上柱，再用不少于5倍柱床體積的蒸餾水洗滌色譜柱，洗去未螯合的金屬離子。（當然也可以把洗凈沒有螯合的填料直接和需要的金屬離子溶液在搖床上震蕩過夜，這樣螯合效果更好，Ni-NTA Agarose尤其適合用這樣的方法。）

（5）用2-5倍柱床體積的起始緩沖溶液平衡柱子，再上樣。

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（6）如果是螯合鐵離子，要注意的是在中性條件下，Fe3+很容易被還原而生成沉淀，所以Fe3+溶液的pH最好是3-5。螯合Fe3+的色譜柱不能長時間保存在中性溶液中。建議每次用完后都要將螯合的Fe3+用50 mMEDTA溶液洗凈，下次使用時再重新螯合。如果洗不干凈，也可以將介質浸在50mM的EDTA中過夜后再清洗保存。

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葡聚糖凝膠不溶于一切溶劑（除非它被化學降解）。它在水、鹽溶液、有機溶劑、堿和弱酸性溶液中都是穩定的，在強酸中凝膠骨架的糖苷鍵被水解。長期接觸氧化劑將破壞凝膠，因而應避免使用。

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葡聚糖凝膠是通過表氯醇交聯多個葡聚糖得到的。葡聚糖凝膠 G-10、G-25這些葡聚糖凝膠是在水溶液中使用，若要用有機溶劑做為流動相。只有通過羥丙基化將葡聚糖凝膠 G轉化為可在有機溶劑中溶脹的葡聚糖凝膠。這時的產品為葡聚糖凝膠 LH-20或LH-60。 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ??

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離子交換葡聚糖凝膠是葡聚糖經環氧氯丙烷交聯后形成的具有多孔三維空間網狀結構和離子交換功能基團的多糖衍生物。它具有親水性強、不會引起生物分子的變性與失活，母鏈對蛋白質、核酸及其他生物分子的非特異吸附能力小的特性。它能引入大量活性基團而骨架不被破壞，交換容量很大，外形呈球形，裝柱后，流動相在柱內流動的阻力較小，流速理想。

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