C3H 10T1/2 2A6小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
產(chǎn)品名稱(chēng)： C3H 10T1/2 2A6小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
英文名稱(chēng)： C3H 10T1/2 2A6
產(chǎn)品編號(hào)： MEMCL-004
產(chǎn)品價(jià)格： 0
產(chǎn)品產(chǎn)地： 上海
品牌商標(biāo)： iCell
更新時(shí)間： null
使用范圍： null
- 聯(lián)系人 : 饒志強(qiáng)
- 地址 : 上海市奉賢區(qū)茂園路260號(hào)臨港南橋科技城56號(hào)樓7層
- 郵編 :
- 所在區(qū)域 : 上海
- 電話 : 199****6615 點(diǎn)擊查看
- 傳真 : 點(diǎn)擊查看
- 郵箱 : 3216812514@qq.com
????????????????????????????????小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
(C3H?10T1/2?2A6)
貨號(hào)：MEMCL-004
細(xì)胞介紹
1972年從C3H小鼠胚胎細(xì)胞中分離建立；在同系小鼠體內(nèi)不能成瘤，未發(fā)現(xiàn)自發(fā)轉(zhuǎn)化；化學(xué)制劑很容易引起該細(xì)胞發(fā)生轉(zhuǎn)化。
細(xì)胞特性
1）?來(lái)源：小鼠胚胎
2）?形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣，貼壁生長(zhǎng)
3）?含量：>1x106?個(gè)/mL
4）?污染：支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性
5）?規(guī)格：T75瓶或者1mL凍存管包裝
運(yùn)輸和保存：使用含有優(yōu)質(zhì)胎牛血清的2ml凍存管發(fā)送存活細(xì)胞。收到細(xì)胞后，可在1000RPM，常溫條件下，離心5min后，于潔凈操作臺(tái)棄去上清，加入推薦使用的培養(yǎng)基后轉(zhuǎn)移至10cm培養(yǎng)皿或者T75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，傳代達(dá)到細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，再進(jìn)行凍存。具體操作見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)步驟。
細(xì)胞用途：僅供科研使用。
???????????????????????
細(xì)胞培養(yǎng)步驟
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）?準(zhǔn)備Eagles?Basal培養(yǎng)基(Eagles?Basal?medium:GIBCO,貨號(hào)21010-046,?添加NaHCO3?1.5g/L,?2?mM?L-谷氨酰胺，及EBSS)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%，添加1%?PS。
2）?培養(yǎng)條件：?氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。?溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）?凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．?細(xì)胞處理：
1）?復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）?細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.?棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.?加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM?EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.?按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.?將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
注意事項(xiàng)：?
1.?收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。
2.?所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
賽百慷（上海）生物技術(shù)股份有限公司
?????地址：中國(guó)（上海）自由貿(mào)易試驗(yàn)區(qū)希雅路11號(hào)14號(hào)樓4樓
??????電話：021-61522780
??????網(wǎng)址：www.icellbioscience.com
">