動物品種

SD大鼠

動物性別

雌雄均可

動物周齡

6-8周

造模方法

1.  造模手術前2 h腹腔注射青霉素鈉2×105 U以抗炎。

2.  麻醉、消毒、固定。

3.  大鼠胸椎T10節段定位：觸及大鼠背部，找到胸椎最高點，往上數3個棘突對應的椎體位置即為胸椎T10節段。

4.  在T9~11節段對應背部行正中直切口，止血鉗鈍性分離開口皮膚與肌肉層之間的黏膜。

5.  輔助固定鉤拉開兩側皮膚，充分暴露手術區肌肉視野，眼科剪于中線（棘突邊緣）兩側肌肉行直切口。如果有少量出血，使用棉簽清潔手術區，眼科剪剪掉T9~11節段區域棘突及其他少量多余肌肉組織，充分暴露T9~11節段椎板。

6.  去除兩側關節突，直接暴露直徑約為0.5cm圓形區域的脊髓背側，注意暴露范圍必須大于選用的玻璃管直徑，不留骨突，以防止重物自由落下時被周圍組織遮擋。  

7.  在暴露的硬膜表面放置一彎曲度與脊髓表面一致的0.5cm×0.3cm大小的弧形塑料墊片（紗布）

8.  將一根內徑剛好能夠容納并允許金屬棒自由滑動的玻璃導管豎直固定在滴定臺蝴蝶夾上，再調整使玻璃導管對正已放置在脊髓背側的墊片，在垂直方向上調整玻璃管高度。

9.  別克針（直徑2.5mm、長11.2cm、重10 g的圓柱狀金屬棒）沿玻璃導管在墊片正上方2.5cm高度處做自由落體運動，撞擊在大鼠脊髓背側的墊片上，致傷能量25 gcf。

10.  將墊片和克氏針迅速移開后觀察大鼠的心跳和呼吸無異常。

11.  依次縫合肌肉、筋膜和皮膚，并用碘伏消毒切口及周圍。在傷口周邊撒上青霉素粉劑以抗感染。

成模鑒定

1.  撞擊后見大鼠軀體顫抖，鼠尾痙攣性擺動，雙下肢迅速回縮撲動后癱瘓，肉眼下見脊髓硬膜下血腫形成，假手術組大鼠只行棘突和椎板切除術，而不對其行SCI造模

2.  BBB運動功能評分法：觀察期為4min，在125cm×125cm空間內進行，采用三人盲法進行評分，評分前對其進行培訓使其詳細掌握評分細則及標準，三人在同一時間獨立觀察大鼠雙后肢的運動功能并記錄進行評分，最后取三個評分中最低值作為功能評分。 

3.  Rivlin斜板試驗：采用改良Rivlin方法，用一預先粘貼好3mm厚橡膠墊的長方形木板作為斜板，斜板可通過與底板連接的鉸鏈進行旋轉來調節斜板傾斜的角度。將大鼠置于斜板之上， 使其頭部向前，身體長軸線垂直于斜板的縱軸。檢測從水平位置(0°)開始，每次使斜板旋轉升高5°，逐漸加大斜板與水平面問的角度，記錄大鼠能夠停留5秒的最大角度為其功能角度值。正常大鼠維持身體停留5秒時，斜板的傾斜角度大約為73° 

4.  HE染色

造模周期

3d

后續檢測指標建議

仔細游離并完整取出傷段及頭尾段共1.0cm的脊髓組織，放入預盛有4％多聚甲醛的離心管中固定24小時，HE染色后光鏡觀察脊髓損傷區及鄰近部位的病理變化。

注意事項

1.  由于術后大鼠體溫較低，應將其放在取暖器旁邊以保持體溫，但也要把握好距離、防止溫度過高，可以將自己的手放在大鼠的位置感覺溫度是否合適。

2.  給大鼠進行排尿護理時，以手指觸摸找到充盈的膀胱，然后按住膀胱底，自上而下擠壓，使尿排出。擠壓時耐心輕柔，切忌粗暴用力。如擠出困難，可用溫水適當刺激膀胱區及外生殖器。防止對尿道區及外生殖器進行不適當的機械刺激，以免尿道水腫及外生殖器水腫翻出，定期清潔。

3.  進行BBB評分前，要將大鼠尿液排凈，以免影響實驗，評分時需認真、仔細觀察大鼠的四肢的行走情況并記錄。BBB評分可歸結為：0～7分，主要看關節動否，有幾個關節動；8～14分，看腳掌能否著地，著地后能否運動，運動是否協調；15～18分，看腳尖能否抓地，腳尖與前進方向是否一致，前后肢運動是否協調；19～21分，看運動時軀干穩不穩定，尾巴翹不翹。

4.  術后護理：術后將動物分籠飼養，自然光照、通風；每天更換清潔、干燥的墊料始終保持干燥；嚴密觀察動物精神狀態、飲食、排尿排便、有無肢體水腫和壓傷、有無泌尿系統血性分泌物等情況，給予人工排尿每日3次；腹腔注射青霉素10萬U/次，每日2次；防止自殘；防止腸梗阻。

5.  模型嚴重程度可以根據實驗要求調整撞擊次數、撞擊高度，建議進行預實驗。