產品介紹

Protonex™ Red 670 AM是Protonex™ Red 670的細胞膜通透性衍生物，其熒光強度會隨環境pH值變化而動態改變：在堿性條件下熒光信號極弱，而在酸性環境中熒光強度達到最大值。當該染料與細胞內酸性靶標（如溶酶體等）結合后，可在632 nm氦氖或647 nm紅色激光激發下發出強烈的紅色熒光，通過監測其熒光強度變化，研究人員能夠實現對活細胞內酸性靶標的特異性標記和動態追蹤。

實驗方案

儲存液配制

所有未使用的儲存液均應分裝為單次使用量，于-20°C避光保存，避免反復凍融。

Protonex™ Red 670 AM儲存液

使用優質無水DMSO配制10-20 mM儲存液。

注：未使用的儲存液需分裝后≤-20°C避光保存，避免反復凍融。 

工作液配制

Protonex™ Red 670 AM工作液

實驗當日將染料溶解于DMSO或解凍儲存液至室溫，用緩沖液（如Hanks和Hepes緩沖液）配制5-20 μM工作液。

注意：1.可添加0.02% Pluronic® F-127增強AM酯水溶性

           2.含有機陰離子轉運體的細胞建議添加1-4 mM丙磺舒（終濃度0.5-2 mM）防止染料外排 

標準實驗方案

重要說明：本方案為哺乳動物活細胞染色參考流程，需根據實際需求優化。

1.接種細胞（如96孔板100 µL/孔或384孔板25 µL/孔）

2.次日加入等體積Protonex™ Red 670 AM工作液（96孔板100 µL/孔，384孔板25 µL/孔）

3.37°C細胞培養箱孵育30-60分鐘

4.用HHBS或選定緩沖液洗去多余染料

5.采用HHBS緩沖液或自選緩沖體系配制化合物板

5.雙模式檢測可選：

a) 熒光顯微鏡檢測：配備Cy5濾光片組

b) 酶標儀檢測：參數設為Ex/Em = 640/680 nm（截止值665 nm）