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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

Celthy mRNA 轉(zhuǎn)染試劑是一款針對(duì) mRNA 細(xì)胞轉(zhuǎn)染的陽(yáng)離子多聚物轉(zhuǎn)染試劑，對(duì)常規(guī)細(xì)胞、原代細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞都具有較高的轉(zhuǎn)染效率。可將其直接加入培養(yǎng)基中，血清的存在不會(huì)影響轉(zhuǎn)染效率，這樣就可以減少無(wú)血清環(huán)境對(duì)細(xì)胞的損傷。轉(zhuǎn)染后一般不需要除去核酸-轉(zhuǎn)染試劑復(fù)合物或更換新鮮培養(yǎng)基，當(dāng)然也可根據(jù)細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)在 4-6 小時(shí)后更換新鮮培養(yǎng)基。

運(yùn)輸與保存方法

冰袋（wet ice）運(yùn)輸。產(chǎn)品 2-8ºC 保存，一年有效。不可冷凍！

注意事項(xiàng)

1、轉(zhuǎn)染操作時(shí)，以細(xì)胞融合度達(dá) 70%-80%為佳，具體鋪板密度根據(jù)細(xì)胞情況酌情而定。

2、制備轉(zhuǎn)染復(fù)合物時(shí)要求用無(wú)血清培養(yǎng)基稀釋 mRNA 和轉(zhuǎn)染試劑。

3、使用無(wú) RNA 酶污染的耗材與試劑。

4、2-8ºC 保存，要注意避免多次反復(fù)長(zhǎng)時(shí)間開(kāi)蓋。

5、初次使用應(yīng)優(yōu)化核酸濃度和試劑量以得到最高的轉(zhuǎn)染效率。

6、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

7、本產(chǎn)品僅用于科研。

使用說(shuō)明

（以 24 孔板為例，其他培養(yǎng)板加樣體積請(qǐng)參考下表）

【注】轉(zhuǎn)染試劑使用量受細(xì)胞類型及其他實(shí)驗(yàn)條件影響，建議初次使用時(shí)設(shè)置梯度進(jìn)行優(yōu)化最佳使用量。

1、細(xì)胞鋪板，至轉(zhuǎn)染操作時(shí)，以細(xì)胞融合度達(dá) 70%-80%為佳。

2、按照以下體系配制 mRNA-轉(zhuǎn)染試劑復(fù)合物：

1）對(duì)于每孔細(xì)胞，使用 10 μL 無(wú)血清培養(yǎng)基（如 OPTI-MEM 培養(yǎng)基）稀釋 0.4 μg mRNA，輕輕混勻。

2）對(duì)于每孔細(xì)胞，使用 10 μL 無(wú)血清培養(yǎng)基（如OPTI-MEM 培養(yǎng)基）稀釋 0.8-1.6 μL轉(zhuǎn)染試劑，輕輕混勻，室溫孵育 5 min。

3）將稀釋的 mRNA 與稀釋的轉(zhuǎn)染試劑輕輕混勻。

4）室溫靜置孵育 20 min。

3、將 mRNA-轉(zhuǎn)染試劑復(fù)合物逐滴加到細(xì)胞中，輕輕混勻。

4、37℃，5% CO₂ 培養(yǎng)箱培養(yǎng) 24-96 h，直至進(jìn)行基因表達(dá)分析。