Vitamin C Assay Kit,Colorimetric Method 維生素C(VC)含量測定試劑盒,比色法
產品名稱: Vitamin C Assay Kit,Colorimetric Method 維生素C(VC)含量測定試劑盒,比色法
英文名稱: Vitamin C Assay Kit,Colorimetric Method 維生素C(VC)含量測定試劑盒,比色法
產品編號: 60433ES
產品價格: 詢價
產品產地: Yeasen
品牌商標: Yeasen
更新時間: 2025-08-01T09:34:22
使用范圍: null
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本試劑盒采用比色法測定維生素C(VC)的含量,測定原理如下:Fe3+與還原型抗壞血酸迅速作用生成Fe2+,后者與啡羅啉顯色反應,可以測定血漿中維生素C的含量。
該方法的優點包括快速簡便,重復性強,適用于適用于可測動物血清/漿、組織等的VC測定。
產品信息
| 貨號 | 60433ES50 |
| 規格 | 50 T |
| 檢測范圍 | 0.2-89.3 μg/mL |
組分信息
| 組分編號 | 組分名稱 | 裝量 | 儲存條件 |
| 60433ES-A | 試劑一 | 5 mL×1瓶 | 2℃~8℃ |
| 60433ES-B | 試劑二 | 1支 | 2℃~8℃ |
| 60433ES-C | 試劑三 | 1支 | 2℃~8℃ |
| 60433ES-D | 試劑四 | 0.2 mL×1瓶 | 2℃~8℃避光 |
| 60433ES-E | 試劑五 | 6 mL×1瓶 | 2℃~8℃ |
| 60433ES-F | 試劑六 | 粉劑6 mg×3支 | 2℃~8℃避光 |
備注:
1)試劑一應用液配制:用時按照試劑一貯備液:蒸餾水=1:14 稀釋,混勻制備。
2)試劑二應用液配制:用時1支粉劑加0.36 mL的冰醋酸再加水至40 mL,溶解,2℃~8℃保存。
3)試劑三應用液配制:因較難溶解,用前2~4小時加95%酒精或無水乙醇60 mL充分溶解制備,2℃~8℃保存。
4)試劑四應用液配制:用時取0.15 mL 試劑四貯備液加水至25 mL 制備,現用現配。
5)試劑六:600 μg/mL Vc 標準品應用液配制:將 1 支標準品粉劑溶于10mL 試劑一應用液中制備;6 μg/mL VC標準品應用液配制:取600 g/mL VC標準品應用液再用試劑一應用液100倍稀釋備用,10分鐘內使用。
【注】:維生素C標準品易氧化,因此,最好在樣本上清液制備好后再配標準,并在10分鐘內進行檢測。
使用說明
1.儀器試劑準備
含536 nm波長的分光光度計、1 cm光徑比色皿(或酶標儀及96孔板)、37℃水浴鍋或恒溫箱、臺式低速離心機、各種規格移液器、雙蒸水、生理鹽水(0.9%)或PBS(0.1M)、渦旋混勻器、試管或離心管、蛋白測定試劑。
2.樣本前處理
1)血清/漿
直接使用。
2)組織
準確稱取待測組織的重量,按重量(g):體積(mL)= 1:9 的比例加入9倍體積的勻漿介質(推薦0.1 mol/L且pH值為7.0-7.4 的磷酸鹽緩沖液或0.9%的生理鹽水),冰水浴條件機械勻漿,2500轉/分,離心10分鐘,取上清液(10%勻漿上清)待測,組織勻漿上清需測定其蛋白濃度。
3.上清液制備
取樣本(或組織勻漿上清)0.15 mL 加試劑一應用液0.45 mL,旋渦混勻,放置15分鐘后離心,3500~4000轉/分,離心10分鐘,上層清亮液體為上清液。組織樣本也可以直接用試劑一應用液作勻漿介質勻漿制備上清液,計算時參考組織計算第二條公式。
4.操作表
| 試劑 | 空白管 | 標準管 | 測定管 |
| 試劑一應用液(mL) | 0.4 | - | - |
| 6μg/mL Vc標準品應用液(mL) | - | 0.4 | - |
| 上清液(mL) | - | - | 0.4 |
| 試劑二應用液(mL) | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
| 試劑三應用液(mL) | 1 | 1 | 1 |
| 試劑四應用液(mL) | 0.25 | 0.25 | 0.25 |
| 充分混勻,37℃水浴30分鐘。 | |||
| 試劑五(mL) | 0.1 | 0.1 | 0.1 |
| 充分混勻,靜置10分鐘,波長536 nm,光徑1 cm,蒸餾水調零,測各管吸光度值。 | |||
5.計算公式
1)液體樣本的計算:
VC含量(μg/mL) = (A測定-A空白)/(A標準-A空白) × C標準 × N
其中,C標準:表示標準品濃度,6 μg/mL;N:表示樣本測試前稀釋倍數(包括前處理稀釋倍數4)
2)組織的計算:
VC含量(μg/mgprot) = (A測定-A空白)/(A標準-A空白) × C標準 × N/Cpr
VC含量(μg/g組織) = (A測定-A空白)/(A標準-A空白) × C標準 × N1 × V樣總/W
其中,C標準:表示標準品濃度,6 μg/mL;N:表示樣本測試前稀釋倍數(包括前處理稀釋倍數4);Cpr:表示組織勻漿蛋白濃度,mgprot/mL;N1:表示用試劑一應用液直接處理的樣本在測試前的稀釋倍數;W:表示樣本質量,g;V樣總:表示樣本用試劑一應用液直接勻漿時加入的試劑一應用液的總體積,mL。
2~8℃保存,有效期6個月。
