?TALEN基因敲除小鼠

TALEN(transcription activator-like effector nucleases,TALENs)靶向基因修飾/敲除技術是最近發展起來的一項極具革命性的新技術。用TALEN方法制作knock out小鼠，不需要經過傳統敲除所需要的ES細胞打靶階段，周期大大縮短。相比于ZFN技術，TALEN的優勢也非常明顯突出，它的識別切割的效率更高，幾乎可以靶向任何序列，不受上下游序列的影響。
TAL (transcription activator-like)effectors是細菌Xanthomonas感染植物時分泌的蛋白分子。這些蛋白分子通過其中心區的34個氨基酸的重復序列識別并結合到宿主基因的啟動子上，激活植物基因的表達，從而幫助細菌進行感染。TAL effectors的此特征很快被大家認識并利用來作為靶向基因編輯的工具。
TALEN(transcription activator-like effector nucleases,TALENs)靶向基因修飾/敲除技術是最近發展起來的一項極具革命性的新技術。TALEN蛋白分子包含DNA結合域和Fok1核酸酶，兩個TALEN分子分別結合到靶點兩側，Fok1形成二聚體并發揮切割作用，生成雙鏈斷端，細胞內的非同源性末端接合(Non-homologousend joining, NHEJ)修復機制啟動，斷口被修復同時隨機的刪除和插入一定數量的堿基，造成移碼導致基因失活。
用TALEN方法制作 knock out小鼠，不需要經過傳統敲除所需要的ES細胞打靶階段，周期大大縮短。相比于ZFN技術，TALEN的優勢也非常明顯突出，它的識別切割的效率更高，幾乎可以靶向任何序列，不受上下游序列的影響。此項技術現已經成功應用于細胞、斑馬魚、果蠅、大鼠、小鼠及植物上，并且被研究者不斷地嘗試應用到其他更多的物種。此技術為研究者提供了一種新的思路，開辟了一條嶄新的道路。

敲除小鼠制作流程

?分析gene序列，選擇靶位點，設計TALEN載體

?測試TALEN載體的打靶效率

?受精卵的顯微注射，移植

?F0代小鼠的鑒定

?F0代小鼠的遺傳檢測

如果您有定制TALEN敲除小鼠的意愿，請聯系我們項目經理將會根據您的要求來制定實驗方案。

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