HB101感受態(tài)細胞
產(chǎn)品名稱: HB101感受態(tài)細胞
英文名稱: HB101
產(chǎn)品編號: MCC1310
產(chǎn)品價格: null
產(chǎn)品產(chǎn)地: 中國
品牌商標: Frdbio
更新時間: 2026-03-20T14:17:38
使用范圍: 僅供科研使用
- 聯(lián)系人 : 趙經(jīng)理
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- 所在區(qū)域 : 湖北省
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HB101感受態(tài)細胞
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
MCC1310 | HB101感受態(tài)細胞 | 100μl*10 |
pUC19(control vector) | 10pg/μl;10μl |
保存條件:-80℃。
1.產(chǎn)品簡介:
本產(chǎn)品是采用大腸桿菌HB101菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細胞,可有效抑制長片段末端重復(fù)區(qū)的重組,可用來制作 DNA 文庫或重組質(zhì)粒的亞克隆。
基因型:F- mcrB mrrhsdS20(rB- mB-) recA13 leuB6 ara-14 proA2 lacY1 galK2 xyl-5 mtl-1rpsL20((strR)glnV44λ-
特點:1. HB101菌株是 E. Coli K12菌株和 E. Coli B 菌株的雜合產(chǎn)物(同時也是Stbl3的原始菌株)。2. recA13 突變可有效抑制長片段末端重復(fù)區(qū)的重組,降低錯誤重組的概率。3. 不含核酸酶 endA1 突變,體內(nèi)核酸酶含量較高,提取質(zhì)粒時務(wù)必使用質(zhì)粒提取試劑盒中去蛋白液。4. hsdS20 背景使 HB101 缺失內(nèi)切酶系統(tǒng),增強了外源 DNA 的穩(wěn)定性和提取質(zhì)量。具鏈霉素抗性,不可用于藍、白斑篩選。pUC19 質(zhì)粒檢測,轉(zhuǎn)化效率可達108 cfu/μlDNA。
2. 使用說明:
1.取100 μl感受態(tài)細胞置于冰浴中融化。
2.待感受態(tài)細胞融化后,向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA(根據(jù)實際情況加入適量的DNA,通常100 μl感受態(tài)細胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴30min。
3.42℃熱擊45sec,然后快速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置2-3min,該過程不要搖動離心管。
4.每個離心管中加入450 μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床, 150 rpm振蕩培養(yǎng)45~60min使菌體復(fù)蘇。
5.根據(jù)實驗需求,取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細胞,加到含相應(yīng)抗生素的SOC或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上,用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開,將平板置于37℃直至液體被吸收,倒置培養(yǎng), 37℃培養(yǎng)12~16h。
3.注意事項:
1.感受態(tài)細胞處于冰水混合狀態(tài)時立即插入冰上。
2.混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。
3.轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少最終用于涂板的菌量。
*本試劑僅供實驗室研究使用
