Frdbio? His標(biāo)簽蛋白純化試劑盒
產(chǎn)品名稱(chēng)： Frdbio? His標(biāo)簽蛋白純化試劑盒
英文名稱(chēng)： Frdbio? His標(biāo)簽蛋白純化試劑盒
產(chǎn)品編號(hào)： PPR0026k
產(chǎn)品價(jià)格： 1ml*2/2880元
產(chǎn)品產(chǎn)地： null
品牌商標(biāo)： Frdbio
更新時(shí)間： 2025-03-27T15:33:45
使用范圍： null
| 規(guī)格 | 價(jià)格 |
| 1ml*2 | 2880.0 |
- 聯(lián)系人 : 趙經(jīng)理
- 地址 : 光谷國(guó)際B座1513
- 郵編 :
- 所在區(qū)域 : 湖北省
- 電話(huà) : 158****4543 點(diǎn)擊查看
- 傳真 : 點(diǎn)擊查看
- 郵箱 : 2633787800@qq.com
- 二維碼 : 點(diǎn)擊查看
產(chǎn)品介紹：
Frdbio® His標(biāo)簽蛋白純化試劑盒用于純化各種表達(dá)系統(tǒng)中含有His標(biāo)簽的重組蛋白，包括大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)、哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)、酵母表達(dá)系統(tǒng)等等;本試劑盒配備了純化蛋白所必需預(yù)裝柱及核心試劑。
本試劑盒中預(yù)裝柱的填料為Ni Beads 4FF。主要優(yōu)勢(shì)如下：
本蛋白純化試劑特點(diǎn)：
Ø Ni Beads 4FF純化可以耐受變性劑，在高濃度尿素和鹽酸胍里仍然可以?huà)熘兓w不是障礙；
Ø 洗脫條件溫和，不會(huì)對(duì)蛋白造成造成損傷；
Ø 填料再生簡(jiǎn)單，反復(fù)使用，實(shí)驗(yàn)室測(cè)試表明再生15次后，Ni Beads 4FF填料效率沒(méi)有明顯降低。
產(chǎn)品主要參數(shù)：
基質(zhì)：交聯(lián)度4%瓊脂糖凝膠
載量：>40mg His標(biāo)簽蛋白
介質(zhì)微球粒徑：45-165um
最大流速：300cm/h
試劑盒已經(jīng)提供材料：
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產(chǎn)品編號(hào) |
預(yù)裝柱 |
濃縮基礎(chǔ)緩沖液（10X） |
濃縮洗脫緩沖液(10X) |
儲(chǔ)存緩沖液 |
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PPR0026k-1mL |
1mL*2 |
30ml |
15ml |
15ml |
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PPR0026k-5mL |
5mL |
30ml*2 |
30ml |
30ml |
其他需要自備試劑材料：
² 待純化蛋白樣品；
² 移液器及吸頭；
² 去離子水；
² 0.22μm或0.45μm濾膜過(guò)濾。
產(chǎn)品儲(chǔ)存
儲(chǔ)存緩沖液：含20%乙醇的1×PBS
儲(chǔ)存溫度：2-8℃
產(chǎn)品使用操作：
1.使用前準(zhǔn)備
1）緩沖液的準(zhǔn)備
基礎(chǔ)緩沖液:
按照實(shí)驗(yàn)所用量，取試劑盒中濃縮基礎(chǔ)緩沖液，加入9倍體積的去離子水稀釋成基礎(chǔ)緩沖液；
洗脫液:
按照實(shí)驗(yàn)所需用量，取試劑盒中濃縮洗脫液，加入9倍體積的去離子水稀釋成洗脫液；
緩沖液在使用之前建議用0.22μm或0.45μm濾膜過(guò)濾。
2）樣品準(zhǔn)備樣品
使用上述基礎(chǔ)緩沖液制備上樣樣品（細(xì)胞/細(xì)菌裂解液），樣品在上樣前用0.22μm或0.45μm濾膜過(guò)濾，防止堵塞柱子。
3）Frdbio® Ni Beads 4FF純化柱的準(zhǔn)備
取出試劑盒中預(yù)裝柱平衡到室溫，打開(kāi)純化柱底部開(kāi)關(guān)，用3-5個(gè)體積去離子水沖洗柱床，隨后用5-10個(gè)柱床體積基礎(chǔ)緩沖液平衡柱子，確保柱床無(wú)氣泡。
2.從樣品中純化目標(biāo)蛋白
1）使用蠕動(dòng)泵上樣或者直接上樣（重力法）；
上樣量不要超過(guò)柱子的結(jié)合能力。
2）上樣完畢后，用基礎(chǔ)緩沖液洗掉未結(jié)合的雜蛋白，直到到紫外吸收監(jiān)測(cè)儀達(dá)到一個(gè)穩(wěn)定的基線(xiàn)（一般需要10-15個(gè)柱體積）；
3）使用洗脫液洗脫目的蛋白，順次接收并做好標(biāo)記，直到到紫外吸收監(jiān)測(cè)儀達(dá)到一個(gè)穩(wěn)定的基線(xiàn)（一般需要5-10個(gè)柱體積）；
4）SDS-PAGE檢測(cè)分析得到的純化樣品（包括流穿組分、洗雜組分和洗脫組分）以及原始樣品,純化樣品根據(jù)后續(xù)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行透析濃縮等。
3.純化柱清洗、再生與保存。
1）5-10倍柱床體積的洗脫緩沖液繼續(xù)清洗；
2）3倍柱床體積的去離子水清洗；
3）5-10倍柱床體積的0.1M NaOH溶液；
4）3倍柱床體積去離子水清洗后于含20%乙醇的PBS 2-8℃保存。
僅供科研實(shí)驗(yàn)使用