產品說明
甘油三脂是植物油和動物脂肪的主要成分，是一種重要的能量來源和食物脂肪載體。在人體中，甘油三酸脂含量過高可能與動脈粥樣硬化、心臟病或胰腺炎等疾病有關。在科研和藥物研究中，方便、直接、自動化的甘油三脂含量檢測手段獲得了廣泛的應用。本公司研制的甘油三脂檢測試劑盒采用一種工作試劑，將甘油三脂的分解與甘油含量的測定合并到同一步驟。在此過程中染色劑氧化生成有色產物，在波長為570nm下檢測，其顏色深淺程度與樣品中甘油三脂的含量成正比。
產品特點
靈敏、準確：用10?μL樣品。甘油三脂的線性檢測范圍為0.01-1.0?mmol/L?(0.88?-?88.5?mg/dL)。
簡單、快捷：整個測試過程只需加入一種工作試劑，并在室溫下培養30分鐘，也可用于高通量檢測。
產品用途
1.?直接檢測血清、血漿等生物樣品中甘油三脂的含量。
2.?用于藥品和藥理學研究，檢測藥物對甘油三脂代謝的影響。
試劑盒規格(采用96孔板可測試100個樣品)
???緩沖液：???24?mL???????????ATP：???250?μL??
???顯色劑：?220?μL???????????混合酶：500?μL
???脂肪酶：?500?μL????
???標準品：?100?μL(相當于100?mmol/L甘油三脂)
儲藏條件：冷凍運輸。?所有試劑于-20°C下保存，保質期3個月。
預防措施：本產品僅供研究用。使用過程中應嚴格遵循實驗安全措施。
檢測步驟
注意：(1)?含有硫氫基的試劑(如：硫氫乙醇，DTT)可能影響檢測，樣品準備中避免此類物質。(2)?如果樣品中含有甘油，可使用甘油檢測試劑盒(Cat＃EGLY-200)，以確定甘油濃度，減去甘油值便得到甘油三酯濃度。
1、將所有試劑放置至室溫，解凍后的混合酶和脂肪酶應置冰上或冰箱保存。用蒸餾水稀釋過的標準品。稀釋比例見下表：
No
標準品+H2O
Vol?(μL)
甘油三脂?(mmol/L)
1
??10?μL+????990?μL
1000
1.0
2
????6?μL?+???994?μL
1000
0.6
3
????3?μL?+???997?μL
1000
0.3
4
?????0?μL?+?1000?μL
1000
0
取透明平底96孔板，在孔中加入10?μL稀釋后的標準品。
樣品處理：檢測前，血清和血漿樣品需用蒸餾水稀釋5倍，細胞和其它固體樣品需用5%的曲通(Triton?X-100)溶液溶解。
大多數樣品(如血清和血漿)不含甘油，不需作樣品的空白對照。若樣品含有甘油，則需空白對照。
將10?μL樣品(和10?μL作為空白對照的樣品)分別放入96孔板的孔中。
2、取潔凈試管，按如下每?反應孔的?比例，配制足量的工作試劑(和空白試劑)。工作試劑：?100?μL?緩沖液，2?μL混合酶，?5?μL脂肪酶，1?μL?ATP，?1?μL染色試劑。
在標準品和樣品孔中加入100?μL工作試劑。輕敲使其混合。
3、在室溫下培養30分鐘，在570nm下讀取吸光度(550-585nm皆可)。
注意：如果樣品的OD值大于1.0?mmol/L標準品的OD值，用蒸餾水稀釋樣品并再次檢測，結果需乘稀釋系數n。
濃度計算
用OD標準品?減去OD水(#4)得到△OD，以此對標準品濃度作圖，測定其斜率。通過以下公式計算樣品中甘油三脂的濃度：
ODSAMPLE、ODH2O是樣品和水(#4)?的吸光度，n?是稀釋系數?(在血清和血漿樣品中n?=?5)。
單位換算：1?mmol/L?甘油三脂相當于88.5?mg/dL或10?ppm。
實驗必需品(未提供)
透明平底96孔板、96孔板吸光率閱讀儀、吸液儀器、離心管