SDS-PAGE凝膠配制試劑盒
產品名稱: SDS-PAGE凝膠配制試劑盒
英文名稱:
產品編號: WBR0401
產品價格: 0
產品產地: 中國
品牌商標: Frdbio
更新時間: 2023-08-15T17:03:56
使用范圍: null
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- 所在區域 : 湖北省
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1.包裝清單:
名稱 | 組分 | 體積 |
A液 | 分離膠緩沖液 | 125ml |
B液 | 分離膠膠液 | 125ml |
C液 | 濃縮膠預混液 | 100ml |
D液 | 催化劑 | 400ul |
E液 | 促凝劑 | 4ml |
3.產品簡介:
聚丙烯酰胺凝膠(SDS-PAGE凝膠)在生物學實驗中被廣泛應用,主要用來分離和鑒定不同分子量大小的蛋白質;應用最為普遍的方式是濃縮膠加上分離膠,前者起到將蛋白樣品進行濃縮的作用,后者則是對蛋白質樣品進行分離。
由于受到試劑來源、純度以及配制方法等因素制約和影響,SDS-PAGE過程中常常出現意想不到問題,而短時間內又無法找到原因,不但如此,繁瑣的制膠過程浪費了科研人員大量的精力和時間。
不同濃度SDS-PAGE分離膠參考分離范圍
?????????SDS-PAGE分離膠濃度 | 分離范圍 |
6%凝膠 | 60-200 kD |
8%凝膠 | 40-100 kD |
10%凝膠 | 20-70 kD |
12%凝膠 | 15-60 kD |
15%凝膠 | 10-40kD |
鑒于以上原因,Frdbio研發的SDS-PAGE試劑盒,采用獨特工藝配方,將分離膠和濃縮膠制成預混液,使用時只需要將凝膠預混液與緩沖液等體積混合并加入少量催化劑和促凝劑混勻后即可灌膠。
4.使用說明:(以配制一塊1.0mm的mini膠為例)
1)取等體積A液和B液(兩種溶液各取2.5 ml)混勻;加入5ul D液,50ul E液,充分混勻。
2)將步驟1中的溶液注入制膠玻璃板中,加入適量水或乙醇等覆蓋于分離膠之上,室溫靜置15min(如果溫度太低可以放在37℃溫箱)。
3)待凝膠(分離膠)充分聚合(水與膠之間出現一條折射線)后,倒去上層水或醇,并用濾紙吸干。
4)取適量C液,一般1.5~2ml,加入2ul D液,20ul E液,充分混勻。
5)將步驟4中的溶液注入制膠玻璃板中分離膠之上,插入梳齒,室溫靜置15min(如果溫度太低可以放在37℃溫箱)。
6)待凝膠(濃縮膠)聚合后,拔去梳齒即可用于電泳。
注:請盡量使用新鮮配置的電泳緩沖液。
5.注意事項:
1)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
2)膠的凝固與溫度有顯著的正相關性。同等條件下,溫度越高,凝固速度越快。如需快速制備凝膠可將其置于37℃
3)使用水封分離膠的時候,加水速度要緩慢。
4)插梳子時,從一側斜向插入,而非水平向插入,可有效避免氣泡。
5)攪拌和加液時應注意避免產生氣泡。
本凝膠試劑盒可以配制試劑盒標注濃度及低于標注濃度的凝膠(比如,10%濃度的試劑盒,可以配制10%,8%,6%濃度的凝膠)。配制本試劑盒標注濃度時候最為簡單,只需要將A,B液等體積混勻,加上催化劑和促凝劑后即可灌膠。配制其他濃度的凝膠首先需要將分離膠膠液用去離子水稀釋到相應濃度(見下表稀釋方法),再等體積與A液(分離膠緩沖液)混合,加入催化劑和促凝劑后灌膠。
高濃度向低濃度稀釋方案
預配制SDS-PAGE膠濃度 | |||||||||
12%凝膠 | 10%凝膠 | 8%凝膠 | 6%凝膠 | ||||||
膠液體積 | 補水體積 | 膠液體積 | 補水體積 | 膠液體積 | 補水體積 | 膠液體積 | 補水體積 | ||
待稀釋凝膠 | 15%分離膠-B液 | 2 | 0.5 | 1.7 | 0.8 | 1.3 | 1.2 | 1.0 | 1.5 |
12%分離膠-B液 | —— | 2.125 | 0.375 | 1.625 | 0.875 | 1.25 | 1.25 | ||
10%分離膠-B液 | —— | —— | 1.946 | 0.554 | 1.497 | 1.029 | |||
8%分離膠-B液 | —— | —— | —— | 1.880 | 0.620 | ||||
*以配制5ml分離膠為例:10%膠向8%膠稀釋時,取10%分離膠-B液1.912ml,加水0.588ml,以此取代步驟一中的8%分離膠-B液2.5ml(以上為精確體積,可保留小數點后1位或2位)
*本試劑僅供實驗室研究使用
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