蛋白雙向電泳/原核蛋白表達/真核蛋白表達

蛋白雙向電泳

隨著后基因組時代的到來，蛋白質組學得到了空前的發展，蛋白質組研究旨在揭示基因表達的真正執行生命活動的全部蛋白質的表達規律和生物功能。包括蛋白質組、蛋白質組學、功能蛋白質組學和結構基因組學等新的概念的提出，蛋白質組學已成為當今生物領域中極其活躍的學科。（Two Dimensional Electrophoresis ，2DE) 是蛋白質組研究的三大關鍵核心技術之一。雙向電泳由于具有高分辨率和高靈敏度已成為分析復雜蛋白混合物的基本工具。

原理：

2DE 的第一向電泳是等電聚焦電泳(Iso-Electric Focusing ，IEF) ，然后通過十二烷基磺酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE) 對蛋白質進行第二向電泳；在IEF 中，蛋白質因等電點不同而被分離，在SDS-PAGE 中，不同分子量的蛋白質相互間被分離開，再用考馬斯亮蘭或銀染進行檢測，經Pdquest 等軟件對結果進行比對、解析。

蛋白雙向電泳相關說明：

1.本表所列的樣品指可用常規方法處理的樣品，如樣品較特殊（富含核酸，鹽分，脂類，色素，多糖等影響雙向電泳而需去除的的雜質或需濃縮樣品），價格將視進一步處理的方法，根據相應費用另行商定。?

2.為了達到好的實驗效果，客戶所送樣品，都要經過我們的樣品制備和雙向電泳預實驗，以確?？蛻繇椖磕茼樌M行。

3.用于一次制備型（考馬斯亮藍染色，用于后續質譜分析）雙向電泳的樣品，動物組織、細胞或細菌的樣品量濕重不少于100mg；植物或真菌樣品量濕重不少于2g；富含雜質或蛋白質含量低的樣品量濕重不少于3g；如直接提供蛋白質提取物，濃度不少于4mg/ml，總量不少于5mg。

蛋白質表達與純化

隨著蛋白藥物市場的快速發展和蛋白質組學研究的深入，高純度活性蛋白的需求越來越大。威斯騰生物中心組建了一支由多名具深厚生物技術基礎與制藥企業工作經驗的留學歸國人員和國內專家為核心的團隊?？蔀閲鴥韧饪蛻籼峁幕虻降鞍准兓恼准夹g服務。

威斯騰服務特色

穩定而多樣的表達系統：威斯騰生物已建立整套的基因克隆與表達體系，無論是單個基因的克隆、表達與純化，還是多個基因高通量的基因克隆、表達和純化，均能選用適合您試驗（科研項目）需要的表達系統和合適的表達載體為您提供優質的服務。

多種純化方式：可為客戶提供多種蛋白純化服務，純化方式包括親和層析純化、凝膠過濾、離子交換、疏水層析等，客戶可根據需要選擇合適的純化方式。

專業的團隊和良好的信息管理體系：專業的基因克隆、蛋白表達與純化技術人員與團隊，具有豐富的表達和純化經驗，可為客戶解決各種瓶頸問題, 良好信息管理體系使我們能夠為客戶提供成熟、高效的基因克隆服務。

操作流程

大腸桿菌和酵母蛋白表達系統：

合成基因（另外收費）或者客戶提供

SDS-PAGE檢測表達

Western blot檢測表達（可選）模板(cDNA、基因組DNA、質粒等)

構建表達載體

篩選陽性克隆

表達優化和可溶性分析

提供結果

１、構建的表達載體及測序報告

２、SDS-PAGE結果

３、篩選的表達菌株

４、Western blot結果

５、實驗流程及結果

６、2ml 1.0×108pfu/ml的病毒（利用昆蟲桿狀病毒蛋白表達系統表達時）

穩定表達細胞株（哺乳動物細胞）

威斯騰實驗服務流程

威斯騰生物服務項目