PhosphoWorks 熒光ATP檢測試劑盒
產(chǎn)品名稱： PhosphoWorks 熒光ATP檢測試劑盒
英文名稱： PhosphoWorks? Fluorimetric ATP Assay Kit
產(chǎn)品編號： 21620
產(chǎn)品價格： 電詢
產(chǎn)品產(chǎn)地： 美國
品牌商標(biāo)： AAT Bioquest
更新時間： 2024-02-28T10:08:34
使用范圍： null
- 聯(lián)系人 : 第五經(jīng)理
- 地址 : 西安市高新區(qū)草堂科技產(chǎn)業(yè)基地秦嶺大道西6號科技企業(yè)加速器二區(qū)9幢2單元20401號房
- 郵編 : 710000
- 所在區(qū)域 : 陜西省
- 電話 : 185****0169 點(diǎn)擊查看
- 傳真 : 點(diǎn)擊查看
- 郵箱 : info@tjbiolite.com;zx@tjbiolite.com
- 二維碼 : 點(diǎn)擊查看
PhosphoWorks 熒光ATP檢測試劑盒是美國AAT Bioquest生產(chǎn)的用于檢測ATP的試劑盒，三磷酸腺苷（ATP）在細(xì)胞能量，代謝調(diào)節(jié)和細(xì)胞信號傳導(dǎo)中起著基本作用。它被稱為細(xì)胞內(nèi)能量轉(zhuǎn)移的“貨幣分子單位”，以驅(qū)動活細(xì)胞中的許多過程和化學(xué)合成。 ATP也是細(xì)胞通訊的信號分子，在DNA和RNA合成中起重要作用。 AAT Bioquest提供了多種生物發(fā)光測定試劑盒，可通過重組螢火蟲熒光素酶（目錄號21610和21609）確定ATP的納摩爾（nM）范圍。這些試劑盒需要酶標(biāo)儀，通常用于細(xì)胞活力或細(xì)胞毒性測定。 PhosphoWorks 熒光ATP分析試劑盒基于一系列ATP誘導(dǎo)的酶偶聯(lián)反應(yīng)，產(chǎn)生過氧化氫，該過氧化氫用我們的Amplite Red底物通過分光光度法定量。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商，為您提供優(yōu)質(zhì)的PhosphoWorks 熒光ATP檢測試劑盒。
產(chǎn)品說明書
樣品實(shí)驗(yàn)方案
簡要概述
1.準(zhǔn)備ATP工作溶液（50 μL）
2.添加ATP標(biāo)準(zhǔn)液或測試樣品（50 μL）
3.在室溫下孵育10-30分鐘
4.監(jiān)測Ex / Em = 540/590 nm（截止= 570 nm）的熒光增加
溶液配制
1.制備儲備溶液
所有未使用的儲備溶液應(yīng)分為一次性使用的等分試樣，并在制備后儲存在-20°C下。 避免重復(fù)凍融循環(huán)。
1.1Amplite 紅色底物儲備液（200X）：
將30 μL DMSO（組分E）加入小瓶Amplite Red Substrate（組分A）中，制成200X Amplite Red Substrate儲備液。
1.2ATP標(biāo)準(zhǔn)溶液（10mM）：
將0.5 mL的ddH2O加入到ATP標(biāo)準(zhǔn)溶液（組分D）的小瓶中，制成10 mM ATP標(biāo)準(zhǔn)溶液。
2.制備標(biāo)準(zhǔn)溶液
ATP標(biāo)準(zhǔn)
將10 μL的10 mM ATP標(biāo)準(zhǔn)溶液添加到990 μL 1X PBS緩沖液中，以生成100 μM ATP標(biāo)準(zhǔn)溶液（AS7）。 取100 μM ATP標(biāo)準(zhǔn)溶液（AS7）并進(jìn)行1：3連續(xù)稀釋，以使用1X PBS緩沖液獲得系列稀釋的ATP標(biāo)準(zhǔn)溶液（AS6-AS1）。
3.制備工作溶液
3.1將5毫升測定緩沖液（組分C）添加到酶混合瓶（組分B）中，并充分混合。
3.2在Enzyme Mix瓶中加入25 μL 200X AmpliteTM Red Substrate儲備液，充分混合以制成APT工作溶液。
樣品示例及操作
表1.黑色96孔微孔板中ATP標(biāo)準(zhǔn)品和測試樣品的布局。 AS = ATP標(biāo)準(zhǔn)品（AS1-AS7，0.14至100 μM），BL =空白對照，TS =測試樣品。
| BL | BL | TS | TS |
| AS1 | AS1 | ... | ... |
| AS2 | AS2 | ... | ... |
| AS3 | AS3 | ||
| AS4 | AS4 | ||
| AS5 | AS5 | ||
| AS6 | AS6 | ||
| AS7 | AS7 |
表2.每個孔的試劑組成
| 孔 | 容積 | 試劑 |
| AS1-AS7 | 50ul | 連續(xù)稀釋（0.14至100 μM） |
| BL | 50ul | 1 X PBS緩沖液 |
| TS | 50ul | 測試樣品 |
1.根據(jù)表1和2中提供的布局，準(zhǔn)備ATP標(biāo)準(zhǔn)品（AS），空白對照（BL）和測試樣品（TS）。對于384孔板，每孔使用25 μL試劑，而不是50 μL。
2.將50 μL ATP工作溶液添加到ATP標(biāo)準(zhǔn)液，空白對照和測試樣品的每個孔中，以使ATP總測定體積為100 μL /孔。 對于384孔板，將25 μL ATP工作溶液添加到每個孔中，總體積為50 μL /孔。
3.避光保存，室溫下孵育反應(yīng)10-30分鐘。
4.使用熒光酶標(biāo)儀在Ex / Em = 540/590 nm（截止= 570 nm）處監(jiān)視熒光增加。