Celthy PEI轉染試劑（AAV專用）
產品名稱： Celthy PEI轉染試劑（AAV專用）
英文名稱： Celthy AAV Transfection Reagent
產品編號： C130005
產品價格：
產品產地： 美國
品牌商標： Arcegen
更新時間： 2025-10-20T09:25:48
使用范圍： null
| 規格 | 價格 |
| 10ml | 13200.0 |
| 1ml | 2200.0 |
| 100ul | 550.0 |
- 聯系人 : 孟醒
- 地址 : 申江南路4388號1幢2層208室
- 郵編 : 201314
- 所在區域 : 上海
- 電話 : 189****7703 點擊查看
- 傳真 : 點擊查看
- 郵箱 : cmeng@magibagbio.com
產品簡介
本試劑是一種專為懸浮體系規?；aAAV而開發,產品是經過優化改造后的線性化聚乙烯亞胺（PolyethylenimineLinear,PEI）。本產品純化學合成，不含動物源成分，細胞毒性低，產品以無菌液體形式提供，具備廣泛的AAV血清型適用性。本產品DNA荷載能力強、轉染復合物比例低和復合物穩定性高，為大規模AAV生產提供便利。
組分信息
|
組分名稱 |
C130005S | C130005M |
| Celthy AAV Transfection Reagent |
100 μL |
1 mL |
儲存條件
2-8ºC保存，有效期2年。
轉染操作流程
1、接種細胞
根據細胞狀態，選擇合適的接種密度，建議細胞接種密度為1-1.5E6 cells/mL，使第二天轉染時細胞密度為2-3E6 cells/mL 為宜。
2、轉染復合物配置(以1 L體系為例)
1）質粒與試劑比例：質粒（μg）與轉染試劑（μL）為1:0.5-1:2。
2）質粒稀釋：使用25 mL無血清培養基稀釋2 mg質粒，并輕輕混勻。
3）試劑稀釋：使用25 mL無血清培養基稀釋2 mL Celthy AAV Transfection Reagent轉染試劑，并輕輕混勻。
4）配置復合物：將配置好的25 mL質粒稀釋液加入到25 mL轉染試劑稀釋液中，輕輕渦旋混勻后，室溫靜置20 min，形成質粒-PEI復合物，備用。
表 1 轉染復合物參數（僅供參考）
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參數類型 |
推薦條件 |
條件范圍 |
|
核酸用量（每百萬細胞） |
1 μg |
0.5 μg-2 μg |
|
核酸與轉染試劑比例（μg:μL） |
1:1 |
1:0.5-1:2 |
|
轉染復合物體積（%培養體積） |
5% |
1%-10% |
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復合物孵育時間 |
20 mins |
15 mins-60 mins |
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復合物介質（無血清等添加物） |
無血清培養基 |
無血清培養基，PBS |
3、轉染細胞
1）直接將50 mL的質粒-PEI復合物均勻加入細胞中。
2）在37℃溫度與5% CO2條件下繼續培養細胞，并在培養72 h后收獲病毒。
表 2 不同細胞培養參數轉染試劑用量（僅供參考）
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細胞培養參數 |
轉染參數 |
||||
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細胞密度 |
培養體積 |
總細胞數量 |
復合物體積 |
DNA用量 |
轉染試劑體積 |
|
2×106 cells/mL |
30 mL |
6E7 cells |
1.5 mL |
60 μg |
60 μL |
|
1 L |
2E9 cells |
50 mL |
2 mg |
2 mL |
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|
100 L |
2E11 cells |
5 L |
200 mg |
200 mL |
|
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2.5×106 cells/mL |
30 mL |
7.5E7 cells |
1.5 mL |
75 μg |
75 μL |
|
1 L |
2.5E9 cells |
50 mL |
2.5 mg |
2.5 mL |
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|
100 L |
2.5E11 cells |
5 L |
250 mg |
250 mL |
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注意事項
1. 為提高轉染效率，建議懸浮細胞在無血清培養體系中馴化幾天后進行轉染操作。
2. 轉染過程中推薦使用高質量的質粒，如無內毒素、無蛋白和RNA殘留的質粒。
3. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套及通風櫥操作。