DNA提取/RNA提取/基因合成
產(chǎn)品名稱： DNA提取/RNA提取/基因合成
英文名稱： Western Biotechnology Inc
產(chǎn)品編號：
產(chǎn)品價(jià)格： 歡迎來電詳詢023-65316016，023—65316556
產(chǎn)品產(chǎn)地： null
品牌商標(biāo)： null
更新時(shí)間： 2023-11-16T15:06:26
使用范圍： null
DNA提取/RNA提取/基因合成
DNA提取
實(shí)驗(yàn)介紹
從新鮮組織、血液、細(xì)胞、細(xì)菌等多種材料中提取基因組DNA，不同種類的材料中提取的基因組DNA量不同，而且差異也比較大，一般材料的基因組
DNA提取情況如下
材料種類 | 樣品要求 | 起始量 | 收量 |
血液 | 新鮮血液及抗凝劑處理的全血 | 100 μl | 1 μg左右 |
培養(yǎng)細(xì)胞 | 離心收集的細(xì)胞 | 1×106 | 10 μg左右 |
動物組織 | 一般材料 | 100 mg | 5~10 μg |
植物 | 一般材料 | 100 mg | 5~10 μg |
細(xì)菌 | 菌懸液或離心收集后的菌體 | 1×108 | 1~2 μg |
客戶須知
1、細(xì)菌、細(xì)胞樣品需新鮮培養(yǎng)；動物組織、植物組織等樣品取樣后需液氮速凍。
2、用于提取基因組DNA的血液樣品在4℃下可保存一周，-20℃下可保存1個月。
3、實(shí)驗(yàn)樣品最好使用干冰運(yùn)輸。
4、結(jié)果提供基因組DNA、完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告（電泳照片、OD值測定結(jié)果等）。
5、不同抗凝種類、抗凝程度、凍存時(shí)間等因素會導(dǎo)致血液樣品之間差異較大、產(chǎn)量不同和價(jià)格有所不同。
實(shí)驗(yàn)周期
大約一周，根據(jù)量的多少而有所不同。
RNA提取
實(shí)驗(yàn)介紹?
TRIZOL試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入時(shí)，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相，離心后可形成水相層和有機(jī)層，這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層（無色）主要為RNA，有機(jī)層（黃色）主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)步驟
在收集到生物材料之后，最好能即刻進(jìn)行RNA 制備工作。若需暫時(shí)儲存，則應(yīng)以液氮將生物材料急速冷凍后，儲存于-80℃冷凍柜。在制備RNA 時(shí)，將存于冷凍柜的材料取出，立即以加入液氮研磨的方式打破細(xì)胞，不可以先行解凍，以避免RNase的作用。
1. 提取組織RNA 時(shí)，每50～100mg 組織用1ml Trizol試劑對組織進(jìn)行裂解；提取細(xì)胞RNA 時(shí)，先離心沉淀細(xì)胞，每5-10 ╳106 個細(xì)胞加1ml Trizol后，反復(fù)用槍吹打或劇烈振蕩以裂解細(xì)胞；
2. 將上述組織或細(xì)胞的Trizol裂解液轉(zhuǎn)入EP 管中,在室溫15~30C下放置5 分鐘；
3. 在上述EP 管中，按照每1ml TRIZOL 加0.2ml 蓋上EP管蓋子，在手中用力震蕩15 秒，在室溫下（15℃～30℃）放置2～3 分鐘后，12000g（2℃～8℃）離心15 分鐘；
4. 取上層水相置于新EP 管中,按照每1ml TRIZOL 加0.5ml 異丙醇的量加入異丙醇，在室溫下（15℃～30℃）放置10 分鐘,12000g（2℃～8℃）離心10 分鐘；
5. 棄上清，按照每1ml TRIZOL 加1ml 75%乙醇進(jìn)行洗滌，渦旋混合，7500g（2℃～8℃）離心5 分鐘，棄上清；
6. 讓沉淀的RNA 在室溫下自然干燥；
7.用Rnase-free water 溶解RNA 沉淀。
基因合成
以前，實(shí)驗(yàn)室通常用PCR和RT－PCR的方法來獲取某個基因片段，但是往往因?yàn)闃?biāo)本和模板等原因無法釣取該段基因。如今，我們采用化學(xué)合成的方法人工構(gòu)建基因片段，即：全基因合成拼接技術(shù)。可以為廣大的科研朋友服務(wù)。
基因合成是指在體外合成雙鏈DNA分子的一門技術(shù),與寡核苷酸合成有所不同，寡核苷酸是單鏈的，所能合成的最長片段僅為100nt左右，而基因合成則為雙鏈DNA分子合成，所能合成的長度范圍50bp-12 kb。可根據(jù)客戶需求，我中心可以提供全基因合成服務(wù)，速度快、周期短、價(jià)格優(yōu)惠。合成的基因可以根據(jù)客戶的需求連接到不同的載體上，最終提供的產(chǎn)品包括菌株以及凍干的質(zhì)粒和全基因完整的測序報(bào)告。
全基因合成的適用范圍：
A: 自然界中無法以常規(guī)實(shí)驗(yàn)手段得到的基因
B:研究人員通過自己的意愿設(shè)計(jì)基因序列,以得到自然界中不存在的基因
C:對已知基因序列進(jìn)行大量密碼子優(yōu)化重排,以期達(dá)到對該基因進(jìn)行高效表達(dá)或獲得新的生物特性等研究目的
服務(wù)優(yōu)勢：
A:合成基因最長已達(dá)到10.5KB,已完成基因超過10000條
B:可以合成重復(fù)序列(重復(fù)次數(shù)無限制).高GC(小于80%).發(fā)夾(參照每200bp小于3個發(fā)夾為限).連續(xù)單一堿基重復(fù)(GC小于15個,AT小于20個)等富含特殊結(jié)構(gòu)的基因注:特殊結(jié)構(gòu)基因合成的相關(guān)數(shù)據(jù)是根據(jù)我公司曾經(jīng)成功合成過的基因序列所做的總結(jié),以作為您設(shè)計(jì)基因序列時(shí)判斷是否能順利合成作為參考,具體還需以實(shí)際基因序列來定
C:基因可以克隆到客戶提供或指定的表達(dá)載體上
D:免費(fèi)提供基因結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì).基因密碼子優(yōu)化,基因克隆表達(dá)方案設(shè)計(jì)等基因合成相關(guān)咨詢服務(wù).
全基因合成操作程序：
1、我們將對您需要合成的基因全序列進(jìn)行分析，檢查基因內(nèi)部是否含有重復(fù)序列，然后根據(jù)序列的具體情況設(shè)計(jì)合成方案。
2、在得到您認(rèn)可后，我們將立即進(jìn)行單鏈Oligo DNA 合成，DNA片段拼接等工作。然后把全長基因克隆到載體中，再通過DNA測序確認(rèn)合成基因的正確性。
3、測序結(jié)果如果發(fā)現(xiàn)有錯誤位點(diǎn)，我們會采取相應(yīng)的技術(shù)手段進(jìn)行修復(fù)校對，保證整個序列的正確性。
結(jié)果提供：
A: 基因合成報(bào)告單一份
B: 含目的基因的質(zhì)粒(不少于1ug)一份
C: 含目的基因的菌株一份
D：基因合成的測序圖譜一份
威斯騰實(shí)驗(yàn)服務(wù)流程
| 分子生物學(xué)檢測 | 蛋白質(zhì)與免疫學(xué) | 動物實(shí)驗(yàn) |
| 實(shí)時(shí)熒光定量PCR | 單克隆抗體制備 | 帕金森疾病模型 |
| 免疫共沉淀（Co-IP） | 多克隆抗體制備 | 抑郁癥動物模型 |
| ELISA（酶聯(lián)免疫吸附法）技術(shù) | Western-blot?實(shí)驗(yàn)服務(wù) | 脊髓損傷模型 |
| 生化指標(biāo)檢測 | 蛋白雙向電泳實(shí)驗(yàn)服務(wù) | 腦外損傷模型 |
| 雙熒光素酶報(bào)告基因檢測 | 原核蛋白表達(dá)純化 | 骨神經(jīng)損傷模型 |
| 染色質(zhì)免疫共沉淀（ChIP） | 真核蛋白表達(dá)純化 | 心肌缺血模型 |
| GST?pull?Down | ITRAQ定量蛋白質(zhì)組學(xué) | 心力衰竭模型 |
| SLAC蛋白組學(xué) | 肺動脈高血壓動物模型 | |
| 高血壓模型 | ||
| 病毒包裝 | 實(shí)驗(yàn)課題整體外包 | 粥樣動脈硬化模型 |
| 過表達(dá)/干擾慢病毒包裝純化 | 整體課題外包 | 大腦中動脈阻塞模型 |
| 過表達(dá)/干擾腺病毒包裝純化 | 細(xì)胞整體實(shí)驗(yàn)外包 | 慢性之氣管炎模型 |
| 逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝純化 | 動物整體實(shí)驗(yàn)外包 | 過敏性哮喘模型 |
| 腺相關(guān)病毒包裝純化 | 肺炎大鼠模型 | |
| 肝炎-肝硬化-肝癌模型 | ||
| 蛋白芯片 | 原代細(xì)胞培養(yǎng) | 肝纖維化模型 |
| 細(xì)胞因子芯片 | 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng) | 膽結(jié)石模型 |
| BioPlex懸浮芯片 | 脂肪干細(xì)胞培養(yǎng) | 急性胰腺炎模型 |
| 生長因子芯片 | 心肌成纖維細(xì)胞培養(yǎng) | 急性腎衰竭模型 |
| 炎癥因子芯片 | 軟骨細(xì)胞培養(yǎng) | 體內(nèi)血栓模型 |
| 血管生成因子芯片 | 血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng) | 關(guān)節(jié)炎模型 |
| 凋亡因子芯片 | 神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng) | I型和II型糖尿病模型 |
| 趨化因子芯片 | 內(nèi)皮組細(xì)胞原代培養(yǎng) | 裸鼠成瘤 |
| HuProt?TM?20K人類蛋白組芯片 | 基因編輯動物 | |
| 電生理相關(guān)服務(wù) | 動物整體實(shí)驗(yàn)服務(wù) | |
| 膜片鉗實(shí)驗(yàn) | ||
| 細(xì)胞生物學(xué)檢測 | 高通量測序 | 代謝組學(xué) |
| 細(xì)胞原代培養(yǎng) | mRNA測序 | 氣相色譜GC/MS |
| MTT檢測 | LncRNA測序 | 液相色譜LC/MS |
| 細(xì)胞凋亡檢測 | 全基因組測序 | 核磁共震NMR |
| 細(xì)胞周期檢測 | RNA-Seq測序 | |
| 細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn) | 外顯子測序 | 影像學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn) |
| Transwell細(xì)
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