基因組文庫(kù)（Genomic Library）構(gòu)建
產(chǎn)品名稱： 基因組文庫(kù)（Genomic Library）構(gòu)建
英文名稱： Western Biotechnology Inc
產(chǎn)品編號(hào)：
產(chǎn)品價(jià)格： 歡迎來電詳詢023-65316016，023—65316556
產(chǎn)品產(chǎn)地： null
品牌商標(biāo)： null
更新時(shí)間： 2023-07-31T09:56:51
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?基因組文庫(kù)（Genomic?Library）構(gòu)建
簡(jiǎn)介：
用限制性內(nèi)切酶切割細(xì)胞的整個(gè)基因組DNA，可以得到大量的基因組DNA片段，然后將這些DNA片段與載體連接，再轉(zhuǎn)化到細(xì)菌中去，讓宿主菌長(zhǎng)成克隆。這樣，一個(gè)克隆內(nèi)的每個(gè)細(xì)胞的載體上都包含有特定的基因組DNA片段，整個(gè)克隆群體就包含基因組的全部基因片段總和稱為基因組文庫(kù)。基因文庫(kù)＝基因組文庫(kù)＋cDNA文庫(kù)?。??
載體的種類和特征：
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? |
受體細(xì)胞 |
結(jié)構(gòu) |
插入片段 |
舉例 |
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質(zhì)粒 |
E.coli |
環(huán)狀 |
很小，<8kb |
pUC18/19?,T-載體,? |
|
λ噬菌體 |
E.coli |
線狀 |
9-24kb |
EMBL，λgt系列 |
|
絲狀噬菌體及噬菌粒 |
E.coli |
環(huán)狀 |
<10kb |
M13系列 |
|
粘粒載體 |
E.coli |
環(huán)狀 |
35-45kb |
? |
|
BAC |
E.coli |
環(huán)狀 |
約300kb |
? |
|
PAC |
E.coli |
環(huán)狀 |
100-800kb |
PCYPAC |
|
YAC |
酵母細(xì)胞 |
線性染色體 |
100-2000kb |
? |
|
MAC |
哺乳動(dòng)物細(xì)胞 |
環(huán)狀 |
>1000kb |
? |
|
病毒載體 |
動(dòng)物細(xì)胞 |
環(huán)狀 |
? |
SV40?載體，昆蟲桿狀病毒載體 |
|
穿梭載體 |
動(dòng)物細(xì)胞和細(xì)菌 |
環(huán)狀 |
? |
pSVK3質(zhì)粒，PBV,Ti質(zhì)粒， |
基因組文庫(kù)構(gòu)建步驟：
1、載體：?
l噬菌體：48.5kb,插入型(最多可容納9kb)、取代型(可容納?38-51kb，最適19-20kb)，?EMBL,?Charon?粘性質(zhì)粒(Cosmid)：4-6kb,?質(zhì)粒+噬菌體的性質(zhì)，可容納大片段的外源基因，最多可容納46kb。?酵母人工染色體克隆體系（YAC，Yeast?Artificial?Chromosome??Cloning?System）?插入大小200—1000kb
2、?載體DNA的制備：?高分子量的外源DNA?100-150kb載體DNA酶切反應(yīng)-----載體臂的純化-----載體脫磷處理?（常用BamHI）???（蔗糖密度梯度離心）??（堿性磷酸酶）?
3、連接和包裝：外源片段與兩臂之間的比例，包裝蛋白?4、感染宿主菌：選擇合適的宿主菌，LE392,?NM538,?NM539,?KW251等?
5、基因組文庫(kù)的保存和擴(kuò)增：?
6、測(cè)滴度，要在106fu以上
7、保存：氯仿4℃，7%?DMSO?-70℃
您需要提供：?
動(dòng)物的血或細(xì)胞、新鮮植物葉片、活體昆蟲或純化好的DNA樣品。
我們提供：
1、文庫(kù)（10%甘油菌）以及菌落效價(jià)（CFU/ml）；
2、隨機(jī)抽樣測(cè)序結(jié)果。
威斯騰實(shí)驗(yàn)服務(wù)流程
威斯騰生物服務(wù)項(xiàng)目
| 分子生物學(xué)檢測(cè) | 蛋白質(zhì)與免疫學(xué) | 動(dòng)物實(shí)驗(yàn) |
| 實(shí)時(shí)熒光定量PCR | 單克隆抗體制備 | 帕金森疾病模型 |
| 免疫共沉淀（Co-IP） | 多克隆抗體制備 | 抑郁癥動(dòng)物模型 |
| ELISA（酶聯(lián)免疫吸附法）技術(shù) | Western-blot?實(shí)驗(yàn)服務(wù) | 脊髓損傷模型 |
| 生化指標(biāo)檢測(cè) | 蛋白雙向電泳實(shí)驗(yàn)服務(wù) | 腦外損傷模型 |
| 雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè) | 原核蛋白表達(dá)純化 | 骨神經(jīng)損傷模型 |
| 染色質(zhì)免疫共沉淀（ChIP） | 真核蛋白表達(dá)純化 | 心肌缺血模型 |
| GST?pull?Down | ITRAQ定量蛋白質(zhì)組學(xué) | 心力衰竭模型 |
| SLAC蛋白組學(xué) | 肺動(dòng)脈高血壓動(dòng)物模型 | |
| 高血壓模型 | ||
| 病毒包裝 | 實(shí)驗(yàn)課題整體外包 | 粥樣動(dòng)脈硬化模型 |
| 過表達(dá)/干擾慢病毒包裝純化 | 整體課題外包 | 大腦中動(dòng)脈阻塞模型 |
| 過表達(dá)/干擾腺病毒包裝純化 | 細(xì)胞整體實(shí)驗(yàn)外包 | 慢性之氣管炎模型 |
| 逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝純化 | 動(dòng)物整體實(shí)驗(yàn)外包 | 過敏性哮喘模型 |
| 腺相關(guān)病毒包裝純化 | 肺炎大鼠模型 | |
| 肝炎-肝硬化-肝癌模型 | ||
| 蛋白芯片 | 原代細(xì)胞培養(yǎng) | 肝纖維化模型 |
| 細(xì)胞因子芯片 | 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng) | 膽結(jié)石模型 |
| BioPlex懸浮芯片 | 脂肪干細(xì)胞培養(yǎng) | 急性胰腺炎模型 |
| 生長(zhǎng)因子芯片 | 心肌成纖維細(xì)胞培養(yǎng) | 急性腎衰竭模型 |
| 炎癥因子芯片 | 軟骨細(xì)胞培養(yǎng) | 體內(nèi)血栓模型 |
| 血管生成因子芯片 | 血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng) | 關(guān)節(jié)炎模型 |
| 凋亡因子芯片 | 神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng) | I型和II型糖尿病模型 |
| 趨化因子芯片 | 內(nèi)皮組細(xì)胞原代培養(yǎng) | 裸鼠成瘤 |
| HuProt?TM?20K人類蛋白組芯片 | 基因編輯動(dòng)物 | |
| 電生理相關(guān)服務(wù) | 動(dòng)物整體實(shí)驗(yàn)服務(wù) | |
| 膜片鉗實(shí)驗(yàn) | ||
| 細(xì)胞生物學(xué)檢測(cè) | 高通量測(cè)序 | 代謝組學(xué) |
| 細(xì)胞原代培養(yǎng) | mRNA測(cè)序 | 氣相色譜GC/MS |
| MTT檢測(cè) | LncRNA測(cè)序 | 液相色譜LC/MS |
| TUNEology 波長(zhǎng)可調(diào)檢測(cè)卡盒-->
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