Stbl3感受態細胞

保存條件：-80℃。

1.產品簡介：

本產品是采用大腸桿菌Stbl3菌株經特殊工藝處理得到的感受態細胞，是慢病毒載體系統推薦使用的菌株。

基因型：F- mcrB mrr hsdS20(rB-, mB-) recA13 supE44 ara-14 galK2 lacY1 proA2 rpsL20(StrR) xyl-5λ-leu mtl-1 endA1+

特點：1．Stbl3來源于HB101 E. coli strain，可有效抑制長片段末端重復區的重組，降低低錯誤重組的概率。2．基因組含有重組酶 recA13 突變，可有效抑制長片段末端重復區的重組，降低錯誤重組的概率。3．菌株不含核酸酶endA1突變，體內核酸酶含量較高，提取質粒時推薦使用質粒提取試劑盒中去蛋白液。菌株具有鏈霉素抗性，不可用于藍、白斑篩選。pUC19質粒檢測，轉化效率可達108 cfu/μlDNA。

2.使用說明：

1．取100 μl感受態細胞置于冰浴中融化。

2．待感受態細胞融化后，向感受態細胞懸液中加入目的DNA（根據實際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態細胞能夠被1 ng超螺旋質粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30min。
3．42℃熱擊45sec，然后快速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3min，該過程不要搖動離心管。
4．每個離心管中加入450 μl無菌的SOC或LB培養基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床， 150 rpm振蕩培養45～60min使菌體復蘇。
5．根據實驗需求，取適量已轉化的感受態細胞，加到含相應抗生素的SOC或LB固體瓊脂培養基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養 37℃培養12~16h。

3.注意事項：

1．剛化凍的細胞轉化效率最高，避免反復化凍。

2．整個動作要輕柔。

*本試劑僅供實驗室研究使用