Annexin V-iFluor 633標(biāo)記
產(chǎn)品名稱： Annexin V-iFluor 633標(biāo)記
英文名稱： Annexin V-iFluor 633 conjugate
產(chǎn)品編號(hào)： 20069
產(chǎn)品價(jià)格： 電詢
產(chǎn)品產(chǎn)地： 美國
品牌商標(biāo)： AAT Bioquest
更新時(shí)間： 2026-05-19T13:28:06
使用范圍： null
- 聯(lián)系人 : 第五經(jīng)理
- 地址 : 西安市高新區(qū)草堂科技產(chǎn)業(yè)基地秦嶺大道西6號(hào)科技企業(yè)加速器二區(qū)9幢2單元20401號(hào)房
- 郵編 : 710000
- 所在區(qū)域 : 陜西省
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| Ex (nm) | 640 | Em (nm) | 654 |
| 分子量 | ~36000 | 溶劑 | Water |
| 存儲(chǔ)條件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
產(chǎn)品介紹
膜膜聯(lián)蛋白（Annexins）是一類依賴鈣離子與磷脂膜結(jié)合的蛋白質(zhì)家族。作為細(xì)胞凋亡研究的核心工具，膜聯(lián)蛋白V（Annexin V）能特異性探知細(xì)胞表面暴露的磷脂酰絲氨酸（PS）——這一特征不僅是凋亡標(biāo)志，也存在于其他細(xì)胞死亡形式中。
細(xì)胞活性的評(píng)估指標(biāo)多樣，其中膜聯(lián)蛋白V-熒光偶聯(lián)物（Annexin V-dye conjugates）通過檢測(cè)PS外翻現(xiàn)象，成為凋亡監(jiān)測(cè)的黃金標(biāo)準(zhǔn)。在凋亡進(jìn)程中，磷脂酰絲氨酸會(huì)從細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)向外側(cè)，這種表面PS的暴露作為凋亡早中期的普適性指標(biāo)，其檢出時(shí)間點(diǎn)甚至早于細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變。
Annexin V-iFluor 633標(biāo)記其光譜特性與Alexa Fluor® 633相似，最大激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)分別約為638 nm和655 nm（注：Alexa Fluor®為Invitrogen公司注冊(cè)商標(biāo)）。
產(chǎn)品實(shí)驗(yàn)操作步驟摘要
1.制備含測(cè)試化合物的細(xì)胞樣本（200 µL/樣本）
2.加入膜聯(lián)蛋白V偶聯(lián)物檢測(cè)溶液
3.室溫避光孵育30-60分鐘
4.使用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡進(jìn)行分析
儲(chǔ)存與處理?xiàng)l件
熒光標(biāo)記膜聯(lián)蛋白V偶聯(lián)物儲(chǔ)存于含0.1%牛血清白蛋白(BSA)的PBS緩沖液(pH 7.4)中。為保持穩(wěn)定性，建議-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融（可能影響蛋白完整性）。在推薦條件下可穩(wěn)定保存至少6個(gè)月。
標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)方案
膜聯(lián)蛋白V偶聯(lián)物細(xì)胞孵育步驟
1.配制膜聯(lián)蛋白V結(jié)合緩沖液：10 mM HEPES，140 mM NaCl，2.5 mM CaCl?，pH 7.4
2.用測(cè)試化合物處理細(xì)胞誘導(dǎo)凋亡（如：Jurkat細(xì)胞用星形孢菌素處理4-6小時(shí)）
3.離心收集細(xì)胞（1-5×10?細(xì)胞/管）
4.用200 μL膜聯(lián)蛋白V結(jié)合緩沖液重懸細(xì)胞
5.加入2 μL膜聯(lián)蛋白V偶聯(lián)物
（可選）加入死細(xì)胞染料如碘化丙啶（貨號(hào)17585）標(biāo)記壞死細(xì)胞
6.室溫避光孵育30-60分鐘
7.在用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡分析細(xì)胞之前，加入300μLAnnexin V綴合測(cè)定緩沖液（來自步驟1）以增加體積
8.使用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡檢測(cè)熒光強(qiáng)度
流式細(xì)胞儀檢測(cè)
使用匹配濾光片的流式細(xì)胞儀定量膜聯(lián)蛋白V結(jié)合情況
注：貼壁細(xì)胞因收獲過程可能損傷膜結(jié)構(gòu)，常規(guī)不建議用于流式檢測(cè)。但Casiola-Rosen等已建立相關(guān)實(shí)驗(yàn)方法。
熒光顯微鏡檢測(cè)
1.從步驟6中吸取細(xì)胞懸液，使用膜聯(lián)蛋白V結(jié)合緩沖液（步驟1）洗滌1-2次，隨后用相同緩沖液重懸細(xì)胞。
2.將細(xì)胞懸液滴加至已覆蓋蓋玻片的載玻片上。
注：對(duì)于貼壁細(xì)胞，建議直接在蓋玻片上進(jìn)行培養(yǎng)。
3.完成膜聯(lián)蛋白V偶聯(lián)物孵育（步驟6）后，用膜聯(lián)蛋白V結(jié)合緩沖液（步驟1）洗滌1-2次，并重新加入該緩沖液至蓋玻片。
4.倒置載玻片觀察細(xì)胞。也可在膜聯(lián)蛋白V偶聯(lián)物孵育后，使用2%甲醛固定細(xì)胞，并通過配備相應(yīng)濾光片組的顯微鏡進(jìn)行觀察。
注：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
西安百螢生物科技有限公司是AAT Bioquest 的中國區(qū)域總代理。西安百螢× AAT Bioquest —— 讓熒光實(shí)驗(yàn)更簡(jiǎn)單，讓檢測(cè)信號(hào)更明亮！