DEAE-纖維素
貨號：C8930
規格：50g/100g
?、簡介
DEAE-纖維素，它采用平均粒徑為50m的顆粒型親水高分子聚合物，表面又用大分子糖鏈接枝，使它有
更高的比表面積和更好的生物兼容性，它在高流水下保持更高載量，同時又具有更好的分辨率。由于比表面
積大，平衡和洗脫的時間也更短。它經過接枝即使是純化病毒，質粒等超大分子的物質，載量基本保持不變。
本產品物理和化學穩定性好，使用壽命長，操作方便。
?、親和填料特性
特點 載量大，分辨率好，流速高，使用方便。
基質 高度交聯纖維素
配基 二乙基氨基乙基
配基密度 40μmol /ml
吸附載量 180mg HSA/ml
填料的顆粒大小 50μm
最大流速 300cm/h
pH范圍 3-10，在位清洗時pH范圍可到2-11
化學穩定性
各種緩沖液及鹽，0.5M NaOH及醋酸，8M脲，6M鹽酸胍，乙醇，異
丙醇等
物理穩定性 0.1M中性緩沖液中，120℃30min
保存溫度 +4~30℃
保存 干粉,1g=3-4ml
三、保存
產品應密封貯存在4℃~30℃（保存溶液為20% 乙醇），通風、干燥、清潔的地方?？砷L期保存。
四、操作步驟：
1、裝柱
（1）所需要用到的材料的溫度要與色譜操作的溫度一樣，液體最好做脫氣處理。填料可直接稱量需要的
量用緩沖液溶漲一小時裝柱即可。
（2）在柱子下端加入20%乙醇，以除去柱子中的空氣，關閉柱子出口，在柱內保留少量的20%乙醇。20%
乙醇容易產生氣泡，可以在里面加1%吐溫避免氣泡產生。也可以換成純水裝柱子，但是需要把填料中的20%
乙醇也換成純水，具體的方法取需要體積的填料在抽濾漏斗上進行，也可以小心傾去填料上的20%乙醇，再
換成5 倍體積的純水，反復沉淀去上清，5 次左右就可以用于裝柱子。
（3）此填料顆粒比較細，所以一定要注意柱子要選擇合適的篩網，不能漏，也可以取點填料加到篩網上
試試，如果沒有問題再將填料連續倒入柱子時，要用玻璃棒的緊靠柱子內壁引流，以減少氣泡的產生，讓填
料先自然沉降到填料體積不再變化，而填料和上面的液體很好分層，上層溶液完全澄清，就可以開泵用適當
的流速壓柱子，填料體積不再變化后，再把轉換頭緊頂在填料上就可以平衡柱子使用。使用的流速要小于裝
柱子的流速。
（4）在裝柱子前，填料從冰箱中取出至少要室溫放置2-3 個小時，這樣避免裝柱子時由于溫度變化而使
柱子中產生氣泡。
2、蛋白的結合
樣品的鹽濃度和pH 要盡量和平衡柱子的緩沖液一致，鹽濃度過高或者pH 帶低也許掛不上，所以要根據
自己的樣品做適當調整。
3、蛋白的洗脫
（1）樣品用平衡液配制，渾濁的樣品要離心和過濾后上樣。鹽濃度太大的樣品處理后再配。
（2）一般情況是讓目標產品結合在柱子上，用平衡液洗去雜質，再選擇一種洗脫液洗下目標產品。
（3）介質對樣品組分吸附的程度取決于樣品的帶電性質、流動相的離子強度和pH 值。鹽濃度小，介質
對樣品組分吸附較牢。用DEAE 介質時，推薦的pH 值是大于目標產品等電點1 個單位。
4、再生清洗
（1）每次用完最好用0.5MNaOH 含2M NaCl 洗 5 個床體積，再用水洗5 個柱床體積，然后用20%乙醇
保存，使用3-5 次后在水洗之后再用70%的乙醇或30%異丙醇都含1%吐溫洗5 個柱床體積，最后20%的乙醇
流洗5 個柱床體積。
（2）有機溶劑和水混合很容易產生氣泡，為了避免這樣情況，可以把配好的有機溶劑在室溫放置過夜，
再使用，這樣可以避免氣泡進柱子而導致柱子不能正常使用。

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