2× Hieff Canace®Veritas Long PCR Master Mix (With Dye)是即用型2× 預混合溶液，包含Hieff Canace® High-Fidelity DNA Polymerase，dNTPs以及優化的緩沖體系，預混液中含有預先添加的電泳指示劑，PCR產物可直接進行電泳，擴增產物為平末端。2× Hieff Canace®Veritas Long PCR Master Mix (With Dye)具有快速簡便、靈敏度高、特異性強、穩定性好等優點，反應體系只需加入引物和模板即可。另外，該產品還含有特異保護劑，使得預混液反復凍融后仍可維持穩定活性。

• 長片段擴增：最長可擴增40kb片段
• 快速延伸：5-10秒/kb延伸速度，省時高效
• 保真性好：83×Taq
• 適用性廣：覆蓋20-80%GC的片段，耐受好
• 靈敏度高：可檢測低至1 pg的λDNA，100pg的基因組DNA
• 穩定可靠：可反復凍融30次

• 最長可擴增40kb片段

最長可擴增40kb片段。以50 ng人基因組DNA為模板，擴增1-40 kb片段，Hieff Canace®Veritas Long PCR Master Mix延伸速度10kb片段以下設置5 sec/kb，10kb片段以上設置10 sec/kb。M1：1 kb DNA Ladder；M2：50 kb DNA Ladder。結果顯示，Hieff Canace®Veritas Long PCR Master Mix可以擴增長達40 kb的人基因組片段。

• 可保證cDNA長片段擴增

可滿足長片段cDNA擴增。以翌圣快速反轉錄試劑盒(Cat#11149ES)反轉錄293 RNA得到的產物為模板，擴增不同長度的cDNA片段。M1：1 kb DNA Ladder；M2：DL15000 DNA Marker。結果顯示，Hieff Canace®Veritas Long PCR Master Mix可滿足1kb-14kb的cDNA擴增。

• 保真性好，可達83×Taq

保真性為83×Taq。采用二代測序方法測量保真度。結果顯示，Hieff Canace®Veritas Long PCR Master Mix保真度是Taq DNA聚合酶的83倍。

• 耐受性好

可耐受一定程度的菌液。分別以不同量的菌液作為模板，結果顯示，Hieff Canace®Veritas Long PCR Master Mix可耐受12.5%比例的菌液，且擴增特異性好。

可耐受一定量cDNA原液。以不同量11149ES的植物反轉錄產物和動物反轉錄產物為模板進行擴增(50 μL總體系)。M：DL10000 DNA Marker。結果顯示，Hieff Canace®Veritas Long PCR Master Mix可滿足15%的cDNA投入量。

• 靈敏度好

分別以1 pg-1 μg不同投入量的擬南芥基因組DNA、小鼠基因組DNA和質粒為模板，進行擴增電泳。結果顯示，Hieff Canace®Veritas Long PCR Master Mix靈敏度好，多數情況下可保證少投入量模板擴增。

-25~-15℃保存，有效期1年。

Q：10166ES這款產品在進行10kb以上的長片段擴增時，是否還按照10kb以下的反應程序去運行？

A：針對10 kb以上的片段時，盡量選用68℃和10 sec/kb兩者進行搭配，以提高擴增成功率。10kb以下的，可以選用5 sec/kb的擴增速度。

Q：10166ES這款產品能否用于長片段的cDNA擴增？實驗中有什么建議？

A：（1）10166ES這款產品可滿足1 kb-14 kb cDNA擴增，如果要進行長片段擴增，推薦使用翌圣生物經驗證的11149ES反轉錄試劑盒對目的RNA進行反轉錄，得到的cDNA模板搭配10166ES進行長片段擴增。

     （2）如果RNA樣本較少或者需要獲得很長的意向片段，建議反轉錄時不進行消化。意向片段越長，投入的RNA就需要越多，對應的cDNA也需要越多。

Q：若擴增產物存在突變怎么辦？

A：10166ES是一款高保真的PCR產品，高保真意味著低錯誤率，更準確的序列。但不同的實驗方式會存在差異，產物突變為低概率事件，建議新擴增多個重復組，從而獲得未突變的擴增產物。

Q：10166ES可以擴增高GC含量的片段嗎？

A：可以，經測試，10166ES可覆蓋20-80% GC含量的片段，建議擴增高GC含量片段時，溫度調整到68℃，成功率會大幅提升。

Q：我的樣本為菌液，是否可以直接使用10166ES去擴增菌液？

A：10166ES可耐受一定程度的菌液，經測試，該產品可耐受比例占比在反應體系12.5%比例的菌液，且特異性較好，如果有需求進行菌液直擴，請將比例控制在12.5%以下。

Q：Hieff Canace®Veritas Long PCR Master Mix(With Dye)能否用于擴增含有尿嘧啶的cDNA模板？

A：10166ES這款產品可耐受一定量的cDNA原液，其中就包含有殘留的RNA和降解的RNA，因此可以用含有尿嘧啶的cDNA作為模板，但存在一定量的范圍，經產品性能測試，10166ES可滿足比例占比在反應體系15%的cDNA投入量。

Q：Hieff Canace®Veritas Long PCR Master Mix(With Dye)能檢測出多少投入量的樣本？

A：（1）針對植物基因組，經產品性能測試，最低能檢測出100pg的植物基因組。

     （2）針對動物基因組，經產品性能測試，最低能檢測出100pg的動物基因組。

     （3）針對質粒，因質粒本身較為純凈，經產品性能測試，最低能檢測出1pg的質粒。

Q：為什么我收到10166ES用過幾次沒有問題，這一次擴增長片段的時候卻沒有條帶？

A：可能原因及解決方案：

(1) 10166ES的解凍要求需要在冰上緩慢解凍，不能常溫解凍或者加熱解凍。

(2) 在擴增長片段時，建議溫度設置68℃，擴增速度為10 sec/kb。

(3) 擴增意向片段越長的時候，投入的模板應當越多。

(4) PCR 體系中引物濃度偏低或循環數不足：適當增加引物用量，或者增加擴增循環數；