產品簡介

D-熒光素（D-Luciferin）是熒光素酶（Luciferase）的常用底物，普遍用于整個生物技術領域，特別是體內活體成像技術。其作用機制是在ATP和熒光素酶的作用下，熒光素（底物）能夠被氧化發光。當熒光素過量時，產生的光量子數與熒光素酶的濃度呈正相關性（見下圖）。將攜帶熒光素酶編碼基因（Luc）的質粒轉染入細胞后，導入研究動物如大小鼠體內，之后注入熒光素，通過生物發光成像技術（BLI）來檢測光強度變化，從而實時監測疾病發展狀態或藥物的治療功效等。也可以利用ATP對此反應體系的影響，根據生物發光強度的變化來指示能量或生命體征。

D-熒光素也常用于體外研究，包括熒光素酶和ATP水平分析；報告基因分析；高通量測序和各種污染檢測。目前市場上有三種產品形式，D-熒光素（游離酸），D-熒光素鈉鹽，以及D-熒光素鉀鹽。這三種產品主要的差別在于溶解特性上。D-熒光素（游離酸）水溶性以及緩沖體系的溶解性都很弱，除非溶于弱堿如NaOH和KOH溶液。溶于甲醇（10 mg/mL）和DMSO（50 mg/mL）。但鈉鹽和鉀鹽形式的D-熒光素能夠非常容易且快速的溶入水或者緩沖液中，使用方便，溶劑無毒性，特別適合體內實驗。配成液體后的這三種產品，在絕大多數的應用上都沒有實質性的差別。

產品說明

產品規格

運輸與儲存

-20℃干燥避光儲存，有效期1年。

操作注意

1. 本品（firefly luciferin）和甲蟲熒光素（beetle luciferin）都是指化合物(S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl) -2-thiazoline-4-carboxylic acid，僅僅是不同公司在命名上的差異。
2. 注射方式，動物類型以及體重等都會影響信號的發射，因此建議每次實驗都要做熒光素酶動力學曲線，確定最佳信號平臺期和最佳的檢測時間。
3. 如果要進行ATP的檢測，盡量避免外源ATP的污染，如操作時戴手套并使用ATP-free的實驗耗材，在進行熒光素的溶解時應使用ATP-free無菌水。
4. 本品保存和操作的過程中都要避光。另外水溶性儲存液過濾除菌后，可以-20℃或-80℃分裝凍存，避免反復凍融。
5. 在進行D-熒光素鈉鹽的溶解時，應使用無鈣鎂離子的DPBS，因鈣鎂離子可能會抑制熒光素酶的活性，此外鎂離子可能會對熒光素的氧化造成影響，從而影響檢測。
6. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

本產品僅作科研用途！

操作說明

1.體外生物發光檢測

1. 用蒸餾水溶解D-熒光素鈉鹽，配制成30 mg/mL的儲存液（200×）?；靹蚝罅⒓词褂茫蚍盅b于-20℃或-80℃凍存，避免反復凍融。
2. 用預熱好的組織培養基將儲存液稀釋至0.15-0.3 mg/mL的工作液濃度。
3. 去除培養細胞的培養基。
4. 待圖像分析前，向細胞內添加熒光素工作液，37℃孵育5-10 min，然后進行圖像分析。

2.活體成像分析

1. 用無菌的DPBS (w/o Mg2+、Ca2+) 配制15 mg/mL的熒光素的儲存液，混勻。
2. 用0.2 µm濾膜過濾除菌。立即使用，或分裝于-20℃避光保存，避免反復凍融。
3. 腹腔注射（i.p.），按照150 mg/kg的熒光素/體重濃度進行注射。
4. 注射入體內10-15 min（待光信號達到最強穩定平臺期）后進行成像分析。

【注】：建議對每只動物模型都需要建立熒光素酶動力學曲線，從而確定最高信號檢測時間和信號平臺期。