封閉用 雞血清(源液)(稀釋10-20倍)
產(chǎn)品名稱: 封閉用 雞血清(源液)(稀釋10-20倍)
英文名稱: chicken serum
產(chǎn)品編號(hào): SL6-10
產(chǎn)品價(jià)格: 0
產(chǎn)品產(chǎn)地: 北京/solarbio
品牌商標(biāo): Solarbio
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封閉血清說(shuō)明書
Blocking?Serum
規(guī)格:10ml
保存:-20℃保存,有效期5年。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:???
封閉血清適用于免疫組化或者免疫熒光實(shí)驗(yàn)中樣本的封閉。可以封閉待檢樣本中與蛋白質(zhì)非特異性結(jié)合的位點(diǎn),另外還可以封閉樣品中內(nèi)源性的Fc片段結(jié)合位點(diǎn),阻斷抗體與樣品中的Fc受體結(jié)合,從而降低背景,減少假陽(yáng)性。在選擇封閉血清時(shí),要注意封閉用血清中不能含有目標(biāo)蛋白,且與一抗來(lái)源不同,可用與二抗相同來(lái)源的封閉血清。
使用方法:
使用時(shí),用PBS(0.01mol/L pH7.2-7.4)將正常血清稀釋10-20倍,直接滴加在組織切片或者細(xì)胞涂片上,37℃度10-30分鐘,清除血清,勿洗,滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗工作液,37℃孵育1-2h或4℃過(guò)夜。
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Western Blot一般流程:
1、蛋白樣品制備:用于蛋白質(zhì)免疫印跡的樣品為蛋白質(zhì)的溶解液,可以是純化后的蛋白質(zhì)樣品,也可以是組織細(xì)胞裂解液。
2、蛋白定量:評(píng)估電泳上樣量或檢測(cè)蛋白含量大小。先?蛋白定量,western后在依據(jù)內(nèi)參定量。
3、電泳:依據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x擇電泳類型,根據(jù)被檢目的蛋白的分子量選擇膠的濃度,制膠,電泳。
4、轉(zhuǎn)膜:將聚丙烯酰胺上的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移至薄膜上,常用半干轉(zhuǎn)或濕轉(zhuǎn)。
5、封閉:選擇適當(dāng)封閉劑將膜上的蛋白質(zhì)結(jié)合位點(diǎn)封閉阻斷。
6、一抗孵育:一抗與特異性抗原的結(jié)合。
7、二抗孵育:二抗與抗原上結(jié)合的一抗的再結(jié)合過(guò)程。
8、底物顯色:二抗一般為標(biāo)記抗體,根據(jù)二抗上的標(biāo)記物來(lái)選擇化學(xué)放光或顯色底物等方法進(jìn)行檢測(cè)。
9、圖片分析:標(biāo)定Marker,進(jìn)行分析與掃描 。
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