土壤堿性磷酸酶活性測定試劑盒(ALP) 可見分光光度法
產品名稱： 土壤堿性磷酸酶活性測定試劑盒(ALP) 可見分光光度法
英文名稱：
產品編號： BC0280
產品價格： 0
產品產地： 北京/中國
品牌商標： Solarbio
更新時間： null
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北京索萊寶科技有限公司--實驗室產品
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?土壤堿性磷酸酶（soil alkaline phosphatase，S-AKP/ALP）活性測定試劑盒
BC0280-50管/48樣 Solarbio 50管/48樣 430.00元
產品簡介：
土壤磷酸酶是一類催化土壤有機磷化合物礦化的酶，其活性的高低直接影響著土壤中有機磷的分解轉化及其生物有效性，是評價土壤磷素生物轉化方向與強度的指標。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH顯著影響。通常按照其最適pH范圍，分為堿性、中性和酸性三種類型磷酸酶。
堿性環境中，S-AKP/ALP催化磷酸ben二鈉水解生成ben酚和磷酸氫二鈉，通過測定酚的生成量即可計算出S-AKP/ALP活性。
試驗中所需的儀器和試劑：
可見分光光度計、臺式離心機、37℃恒溫培養箱、分析天平、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、冰、蒸餾水、無水乙醇和甲ben。
產品內容：
試劑一：液體×1瓶，4℃避光保存。
試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存。用前加50mL蒸餾水充分溶解。
試劑三：液體×1瓶，4℃保存。
試劑四：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加1152μL無水乙醇（自備），48 μL蒸餾水充分溶解。（變褐色后不能再使用）
標準品：液體×1瓶，0.5μmol/mLben酚標準液，4℃保存。
操作步驟：
催化反應： ??
稱取風干混勻土壤約0.1g，加入0.05mL甲苯（自備），輕搖15min；加0.4 mL試劑一并且搖勻后，置于37℃恒溫培養箱，開始計時，催化反應24h；到時后迅速加入1mL試劑二充分混勻，以終止酶催化的反應。10000rpm室溫離心10min，取上清液置于冰上待測。
顯色反應：
1. 分光光度計預熱30 min以上，調節波長到660 nm，蒸餾水調零。
2. 空白管：取1mL玻璃比色皿，加入50 μL蒸餾水，100 μL試劑三，20 μL試劑四，充分混勻，顯色后再加蒸餾水830 μL，混勻后室溫靜置30 min，于660 nm測定吸光度，記為A空白管。
3. 標準管：取1mL玻璃比色皿，加入50 μL標準液，100 μL試劑三，20 μL試劑四，充分混勻，顯色后再加蒸餾水830 μL，混勻后室溫靜置30 min，于660 nm測定吸光度，記為A標準管。
4. 測定管：取1mL玻璃比色皿，加入50 μL上清液，100 μL試劑三，20 μL試劑四，充分混勻，顯色后再加蒸餾水830 μL，混勻后室溫靜置30 min，于660 nm測定吸光度，記為A測定管。
S-ALP活性計算：?
活性單位定義：37℃中每克土壤每天釋放1μmol酚。
S-AKP/ALP（U/g土樣）=[C標準液×(A測定管－A空白管)÷(A標準管－A空白管)]×V總÷W÷T?
= 0.725×(A測定管－A空白管)÷(A標準管－A空白管)÷W
C標準液：0.5μ mol/L；V總：催化體系總體積，1.45mL；W：土壤樣品質量，g；T：催化反應時間，24 h=1 d。
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