凝膠DNA回收試劑盒-常用生化試劑-試劑-生物在線
杭州沃森生物技術有限公司
凝膠DNA回收試劑盒

凝膠DNA回收試劑盒

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產品名稱: 凝膠DNA回收試劑盒

英文名稱: DNA Gel Extraction Kit

產品編號: 2001050

產品價格: 0

產品產地: 中國

品牌商標: simgen

更新時間: null

使用范圍: null

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20-30分鐘內即可完成凝膠中DNA的回收。??????????????????????????????????

·最高可以達到85%的回收效率。

·核酸純化柱無須平衡液處理,可最大吸附10μg DNA。

適用于從各種瓊脂糖凝膠中回收100bp-10 kb 的DNA?
·20-30分鐘內即可完成凝膠中DNA的回收。
·最高可以達到85%的回收效率。
·核酸純化柱無須平衡液處理,可最大吸附10μg DNA。
·溶液中所含的pH指示劑可直觀地判斷溶液中DNA與硅膠膜的最適宜結合條件。
·可用30 μl微量洗脫體積洗脫DNA。?????????????????????????????????????????????????????????????????

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右圖:
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30 μl 100 bp DNA Marker
加入到120μl融化1.5%瓊脂糖凝膠中制成含有不同長度DNA片段的凝膠塊,Simgen?凝膠DNA回收試劑盒(I)回收DNA后,用30 μl Buffer TE脫(a, b, c, d),與起始的DNA Marker70%,100%)對照各個片段的回收效率。

1.5% TAE?瓊脂糖凝膠電泳。? ??


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產品原理
特殊設計的融膠緩沖液可在溶膠的同時調整完成溶液中DNA與硅膠膜的最佳結合條件,溶液中的DNA經過離心步驟結合到純化柱上,溶解的凝膠分子與其他等雜質則被過濾出去,結合在純化柱上的DNA最后用TE溶液洗脫下來。
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操作步驟
切下含有DNA的瓊脂糖凝膠,加入溶膠緩沖液,將溶化后的凝膠溶液加入到核酸純化柱中,經過離心步驟使DNA結合到純化柱上。經清洗液洗滌一次純化柱上的DNA后,DNA即可被TE溶液洗脫下來。

可適用的分子生物學實驗
DNA測序
基因芯片分析?
DNA連接與轉化?
限制性酶切?
標記
微注射?
PCR?
體外轉錄

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常見問題分析

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1.?????回收不到DNA或者DNA的回收效率低

可能的原因

1Buffer WGBuffer WB中未加入無水乙醇應按比例補加無水乙醇。如果是錯誤地加入了其他試劑,請向我公司技術部尋求幫助。

2Buffer WGBuffer WB中錯誤地加入了70%乙醇。請向我公司技術部尋求幫助。

3DNA的洗脫效率差。參考說明書第3頁柱純化技術中的第4洗脫DNA內容優化DNA的洗脫方案。

4)將溶液加入到純化柱前應觀察Buffer GBuffer P是否保持著原來的橙黃色,如果溶液變為紫紅色,必須加入約10 μl 3 M醋酸鈉(pH 5.0)使溶液恢復至原來的橙黃色,否則將嚴重影響DNA結合到純化柱上。

僅凝膠回收:

5)制作的凝膠從加樣孔至DNA泳動方向呈現為一個降低的斜面,DNA在泳動的過程中大量地流失到電泳緩沖液中。制作瓊脂糖凝膠時應注意放平制膠槽,并加入足夠量的凝膠液。

6)凝膠沒有完全被溶解,DNA仍保留在未溶解的凝膠中。在50°C溶膠時每隔2-3分鐘請將離心管漩渦振蕩數秒以幫助凝膠徹底溶解。

7)在凝膠溶解后的溶液中加入異丙醇出現霧狀沉淀。出現該種現象主要是因為凝膠沒有被徹底溶解,此時應注意不要省略后續的Bufffer G的洗滌步驟,并且加入BufferG到純化柱中后室溫靜置1分鐘,以增強對未溶解的凝膠的洗滌效果。

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2.????回收的DNA生物學活性差

1)??回收的DNA中鹽分殘留量過高。向純化柱中加入Bufffer WG或者Bufffer WB后,室溫靜置5分鐘后再離心,可最大程度地洗去純化柱上殘留的鹽分。

2)??回收的DNA中乙醇殘留量過高。注意不可省略高速空離(14000 rpm?離心1分鐘)步驟。

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