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適用于從各種瓊脂糖凝膠中回收100bp-10 kb 的DNA?
·20-30分鐘內(nèi)即可完成凝膠中DNA的回收。
·最高可以達(dá)到85%的回收效率。
·核酸純化柱無須平衡液處理，可最大吸附10μg DNA。
·溶液中所含的pH指示劑可直觀地判斷溶液中DNA與硅膠膜的最適宜結(jié)合條件。
·可用30 μl微量洗脫體積洗脫DNA。?????????????????????????????????????????????????????????????????

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右圖:
?30 μl 100 bp DNA Marker加入到120μl融化的1.5%瓊脂糖凝膠中制成含有不同長度DNA片段的凝膠塊，經(jīng)Simgen?凝膠DNA回收試劑盒(I型)回收DNA后，用30 μl Buffer TE洗脫（a, b, c, d），與起始的DNA Marker（70%，100%）對照各個片段的回收效率。

1.5% TAE?瓊脂糖凝膠電泳。? ??

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產(chǎn)品原理
特殊設(shè)計的融膠緩沖液可在溶膠的同時調(diào)整完成溶液中DNA與硅膠膜的最佳結(jié)合條件，溶液中的DNA經(jīng)過離心步驟結(jié)合到純化柱上，溶解的凝膠分子與其他等雜質(zhì)則被過濾出去，結(jié)合在純化柱上的DNA最后用TE溶液洗脫下來。
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操作步驟
切下含有DNA的瓊脂糖凝膠，加入溶膠緩沖液，將溶化后的凝膠溶液加入到核酸純化柱中，經(jīng)過離心步驟使DNA結(jié)合到純化柱上。經(jīng)清洗液洗滌一次純化柱上的DNA后，DNA即可被TE溶液洗脫下來。

可適用的分子生物學(xué)實驗
DNA測序
基因芯片分析?
DNA連接與轉(zhuǎn)化?
限制性酶切?
標(biāo)記
微注射?
PCR?
體外轉(zhuǎn)錄

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常見問題分析

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1.?????回收不到DNA或者DNA的回收效率低

可能的原因：

1）Buffer WG或Buffer WB中未加入無水乙醇，應(yīng)按比例補加無水乙醇。如果是錯誤地加入了其他試劑，請向我公司技術(shù)部尋求幫助。

2）Buffer WG或Buffer WB中錯誤地加入了70%乙醇。請向我公司技術(shù)部尋求幫助。

3）DNA的洗脫效率差。參考說明書第3頁柱純化技術(shù)中的第4點“洗脫DNA”內(nèi)容優(yōu)化DNA的洗脫方案。

4）將溶液加入到純化柱前應(yīng)觀察Buffer G或Buffer P是否保持著原來的橙黃色，如果溶液變?yōu)樽霞t色，必須加入約10 μl 3 M醋酸鈉（pH 5.0）使溶液恢復(fù)至原來的橙黃色，否則將嚴(yán)重影響DNA結(jié)合到純化柱上。

僅凝膠回收：

5）制作的凝膠從加樣孔至DNA泳動方向呈現(xiàn)為一個降低的斜面，DNA在泳動的過程中大量地流失到電泳緩沖液中。制作瓊脂糖凝膠時應(yīng)注意放平制膠槽，并加入足夠量的凝膠液。

6）凝膠沒有完全被溶解，DNA仍保留在未溶解的凝膠中。在50°C溶膠時每隔2-3分鐘請將離心管漩渦振蕩數(shù)秒以幫助凝膠徹底溶解。

7）在凝膠溶解后的溶液中加入異丙醇出現(xiàn)霧狀沉淀。出現(xiàn)該種現(xiàn)象主要是因為凝膠沒有被徹底溶解，此時應(yīng)注意不要省略后續(xù)的Bufffer G的洗滌步驟，并且加入BufferG到純化柱中后室溫靜置1分鐘，以增強對未溶解的凝膠的洗滌效果。

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2.????回收的DNA生物學(xué)活性差

1）??回收的DNA中鹽分殘留量過高。向純化柱中加入Bufffer WG或者Bufffer WB后，室溫靜置5分鐘后再離心，可最大程度地洗去純化柱上殘留的鹽分。

2）??回收的DNA中乙醇?xì)埩袅窟^高。注意不可省略高速空離（14000 rpm?離心1分鐘）步驟。