【評價原理】

神經毒性通常指某些藥物影響機體的神經傳導，導致神經傳導中斷或減弱，從而影響機體的正常功能。斑馬魚的基因與人類基因的相似度達到87％，神經系統形成過程和發育機制與人類高度相似，在6 hpf（受精后6小時）神經系統開始發育，受精6天后所有神經系統發育完成。斑馬魚在短時間內形成整個神經系統，為神經毒性的評價帶來了有利的條件。而且斑馬魚對藥物神經毒性的預測準確性高，同時兼具快速、高效、經濟的優點。

我們評價斑馬魚神經毒性有3個指標：1.行為學；2.中樞神經凋亡細胞熒光信號強度；3. 外周運動神經長度。

【實驗方案】

我們將受測試斑馬魚分成兩組，分別是正常對照和服用/注射供試品組（供試品通過溶解到養魚用水中或注射的方式攝入到斑馬魚體內）。

服用/注射藥物一段時間后，我們觀察斑馬魚的運動行為，通過熒光染色觀察中樞神經凋亡細胞，也可以利用轉基因運動神經綠色熒光NBT品系斑馬魚觀察外周運動神經長度。

【結果展示】

圖1. 斑馬魚神經毒性運動軌跡圖

可以看到，服用/注射供試品組斑馬魚運動明顯減少。

圖2. 斑馬魚光暗刺激下每分鐘運動速度表型圖

可以看到，服用/注射供試品組斑馬魚對光暗刺激不敏感。

圖3. 斑馬魚中樞神經凋亡細胞表型圖

黃色虛線框內為中樞神經分析區域，綠色熒光小點為凋亡細胞

可以看到，服用/注射供試品組斑馬魚中樞神經細胞凋亡明顯增加。

圖4. 斑馬魚外周運動神經表型圖

可以看到，服用/注射供試品組斑馬魚外周運動神經明顯縮短。

【評價結論】

1.經過每組30尾斑馬魚的對比實驗，服用/注射供試品組的斑馬魚運動明顯減少且對光暗刺激不敏感，中樞神經細胞凋亡增加且外周運動神經縮短，與正常對照組存在明顯的差別。

2.本實驗證實了該供試品對斑馬魚有神經毒性。

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