實驗原理

? ? ? ?細胞免疫化學與免疫組織化學實驗都是依據抗原抗體反應和化學顯色的原理，采用標記的特異性抗體對組織或細胞內抗原的分布進行原位檢測技術。細胞免疫化學將培養處理后的細胞爬片、固定、破膜、封閉后，加入一抗與抗原蛋白結合，再加入標記有熒光素的二抗與一抗進行反應，最后通過激光共聚焦掃描顯微鏡進行熒光拍攝來顯示細胞中靶蛋白的表達變化和定位。

? ? ? ?激光共聚焦掃描顯微鏡（Confoccal Laser Scanning Microscope, CLSM）是現在細胞生物醫學分析儀器之一，采用激光作掃描光源，逐點、逐行、逐面快速掃描成像，掃描的激光與熒光收集共用一個物鏡，物鏡的焦點即掃描激光的聚焦點，也是瞬間成像的物點。從一個點光源發射的探測光通過透鏡聚焦到被觀測物體上，如果物體恰在焦點上，那么反射光通過原透鏡應當匯聚回到光源，這就是所謂的共聚焦。由于激光束的波長較短，光束很細，所以共焦激光掃描顯微鏡有較高的分辨力，大約是普通光學顯微鏡3倍。系統經一次調焦，掃描限制在樣品的一個平面內。調焦深度不一樣時，就可以獲得樣品不同深度層次的圖像，這些圖像信息都儲于計算機內，通過計算機分析和模擬，就能顯示細胞樣品的立體結構。

技術應用

檢測靶蛋白如內分泌激素、蛋白質、多肽、核酸、神經遞質、受體、細胞因子、細胞表面抗原、腫瘤標志物。