超級核酸酶

產品貨號：FrdE00004

儲存溫度：2-8℃

來源：E.coli

1、產品簡介

超級核酸酶(Benzonase Nuclease)是來源于Serratia Marcescens，經過基因工程

改造的核酸酶。它能夠在非常廣泛的條件下(6M urea，0.1 M Guanidine HC1 0.4%Triton

X-100，0.1%SDS，1 mM EDTA，1 mM PMSF)，降解所有形式的(雙鏈，單鏈，線狀，環狀)DNA和RNA。它將核酸完全消化成3-8個堿基長度的5一單磷酸寡核苷酸。超級核酸酶適用于去除蛋白質產品中的污染，符合FDA關于核酸污染去除的規程。

本產品可以與多種細胞細菌裂解液配合使用,去除粗提物中的核酸，降低溶液粘性，提高蛋白質產量。本公司超級核酸酶經特殊工藝表達純化，無蛋白酶、內毒素污染，沒有標簽方便下游實驗操作。

表1.超級核酸酶產品性能。

1.2酶活定義

37°C，pH 8.0反應條件下，2.625ml的反應體積，在30分鐘內使·A260值降低1.0(相

當于完全消化37 ug鮭魚精DNA)的酶量定義為一個活性單位(U)。

1.3產品應用

1)去除核酸污染:在蛋白純化時與細胞裂解液配合，可有效降低樣品黏度，利于下游操作;

2)降解核酸，利于不可溶蛋白復性前高質量包涵體的制備;

3)有效去除帶負電荷的核酸對蛋白樣品分離和檢測的影響;

4)疫苗和病毒樣品制備過程中DNA污染的去除。

5)減少存放的外周血單細胞(PBMC)的結塊現象。

6)用于對任何蛋白樣品結合的核酸的預處理，提高蛋白在2D凝膠電泳中的分辨率。

2.操作步驟

2.1大腸桿菌或者其他細菌樣本處理

細菌離心收集后，用10倍體積的TBS緩沖液重懸，菌體破碎后，每毫升菌體裂解液

加入1-2微升超級核酸酶(若添加終濃度為5-10mM的Mg2+，則效果更佳)，室溫孵育

30分鐘，收集裂解液，離心取上清即可進行下游實驗。

2.2細胞樣本處理

1)貼壁細胞去除培養基，用PBS洗后，100微升RIPA裂解液(或其他哺乳動物細胞裂解

液)加1-5微升超級核酸酶，室溫孵育30分鐘，收集裂解液，離心取上清即可進行下游實

驗。

2)懸浮細胞離心收集后，在離心管中加100微升RIPA裂解液(或其他哺乳動物細胞裂解

液)加1-5微升超級核酸酶，室溫孵育30分鐘，收集裂解液，離心取上清即可進行下游實

驗。

2.3組織樣本處理

將30-100毫克動物或者植物組織研磨充分后，加入100-200微升裂解液，同時加入

加1-5微升超級核酸酶，室溫孵育30分鐘，收集裂解液，離心取上清即可進行下游實驗。

3.注意事項

1)避免使用磷酸鹽緩沖液。

2)含大量蛋白、細胞壁、其它鹽分的粗制品，對該酶活性有部分抑制作用，使用時需要增加

酶的用量。

3)超級核酸酶有超強的試劑兼容性如:6M urea，0.1 M Guanidine HCl，0.4%Triton X-100，

0.1%SDS，1 mM EDTA，1 mM PMSF，100mM DTT，當超過該濃度時核酸酶活性會降低，可通過增加核酸酶量使活性得到補償。

*本試劑僅供實驗室研究使用