AdMax腺病毒pBHGloxdelE13cre骨架 及 穿梭質(zhì)粒pDC315,pDC315-shRNA1,pDC315-EGFP
產(chǎn)品名稱: AdMax腺病毒pBHGloxdelE13cre骨架 及 穿梭質(zhì)粒pDC315,pDC315-shRNA1,pDC315-EGFP
英文名稱: AdMax adenovirus
產(chǎn)品編號: JR20121028
產(chǎn)品價格: 0
產(chǎn)品產(chǎn)地: 美國
品牌商標(biāo): microbix
更新時間: 2025-10-21T10:34:11
使用范圍: null
- 聯(lián)系人 :
- 地址 : 上海市長海路225號
- 郵編 :
- 所在區(qū)域 : 上海
- 電話 : 150****6721 點擊查看
- 傳真 : 點擊查看
- 郵箱 : jiranbio@163.com
常用腺病毒載體的包裝方法包括: 1) 經(jīng)典的同源重組法(雙質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染):原理是同源重組。在腺病毒左臂區(qū)域(通常缺失E1基因區(qū))插入目的基因表達(dá)盒構(gòu)成腺病毒穿梭質(zhì)粒,與帶有腺病毒全基因組(通常缺失E1基因區(qū))的大質(zhì)粒共同轉(zhuǎn)染攜帶E1基因區(qū)的細(xì)胞如293細(xì)胞,兩種質(zhì)粒在293細(xì)胞內(nèi)通過同源重組形成重組腺病毒基因組,并包裝成病毒顆粒。主要缺點是重組效率比較低。 2) Ad-Easy法:原理是通過同源臂重組的方式在細(xì)菌中獲得重組腺病毒基因組質(zhì)粒。將克隆了外源基因的腺病毒穿梭質(zhì)粒與攜帶了腺病毒大部分基因組的質(zhì)粒共轉(zhuǎn)化RecA+細(xì)菌,在細(xì)菌RecA重組酶的作用下經(jīng)抗性篩選獲得重組腺病毒基因組質(zhì)粒,將其線性化后轉(zhuǎn)染293細(xì)胞獲得重組病毒。 3) AdMax包裝系統(tǒng):通過Cre/loxP獲得重組病毒,這個過程發(fā)生在293細(xì)胞中,從而避免在細(xì)菌中重組。將克隆了外源基因的腺病毒穿梭質(zhì)粒與攜帶了腺病毒大部分基因組的包裝質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染293細(xì)胞,利用Cre/loxP系統(tǒng)的作用實現(xiàn)重組,產(chǎn)生重組腺病毒。這個系統(tǒng)有多種優(yōu)勢,包括操作簡便、重組效率高、獲得的病毒產(chǎn)率高(一般大于10(4)vp/cell)、目的基因的表達(dá)水平高(因為mCMV啟動子比hCMV啟動子強若干倍)等。鑒于這些特點,本公司推薦用AdMax包裝系統(tǒng)制備腺病毒載體。AdMax系列有多種,其中最常用的是AdMax kit D。
