I-SAGE DITAG PCR MODULE

描述：
SAGE?（基因表達的系列分析）技術使得以下廣泛的基因組范圍的表達分析成為可能：
? 對基因表達水平的定量或數字化測量，實現了多重數據比較
? 生成樣品中轉錄產物的綜合基因表達圖譜，可以實現低量轉錄產物的檢測和異?；虻拇_定(1)
利用LongSAGE? (2)生成的基因表達圖譜對于低量轉錄產物的檢測來說非常敏感，即使在不知道序列的情況下，也可以確定異常基因。
LongSAGE?相對于傳統的SAGE?法引入了以下幾個優點：
? 增加的LongSAGE?標記長度(21 bp)提供了更大的特異性，使基因之間的區分和異?；虻臋z測變得更容易。
? 增加的標記長度實現了標記在其基因組位置的確定，使得克隆和后續分析變得更加簡易。
? LongSAGE?標記可以用來設計篩選cDNA庫和基因特異性引物的探針，用于快速擴增cDNA末端和RT-PCR，同時有利于新基因的分離。
I-SAGE?長試劑盒的工作原理
I-SAGE?長試劑盒使用先前所描述過的SAGE?方法生成SAGE?庫。I-SAGE?長試劑盒試驗方案使用標準分子生物學技術來建立SAGE?庫。庫是
通過分離一種稱為標記的確定21bp區域而不是每個轉錄產物的完整序列來的建立的。標記包含可以專門識別每個mRNA轉錄產物的足夠序
列。這些標記被連接到多聯體上，然后進行克隆、測序。因為PCR的所有模版均為130bp，所以沒有PCR長度偏移。多聯體克隆的快速高流
通量測序將確定每個克隆中獨立標記的數量。SAGE?分析軟件將測序得出的數據以數字的形式記錄下來，以備現在和將來的分析。SAGE?的
數據可以與SAGEmap (www.ncbi.nlm.nih.gov/SAGE)、SAGE Genie (cgap.nci.nih.gov/SAGE)參考數據庫和其他的SAGE?庫相比較。SAGE?
分析軟件可以從www.invitrogen/sage下載。