馬外周血造血干細(xì)胞分離液
產(chǎn)品名稱(chēng)： 馬外周血造血干細(xì)胞分離液
英文名稱(chēng)：
產(chǎn)品編號(hào)： LGS1090HW
產(chǎn)品價(jià)格： 0
產(chǎn)品產(chǎn)地： 天津
品牌商標(biāo)： TBD
更新時(shí)間： null
使用范圍： null
上海研謹(jǐn)生物科技有限公司
- 聯(lián)系人 :
- 地址 : 上海市北青公路6725弄6號(hào)2幢2層B區(qū)
- 郵編 : 201700
- 所在區(qū)域 : 上海
- 電話 : 135****7991 點(diǎn)擊查看
- 傳真 : 點(diǎn)擊查看
- 郵箱 : yanjinbio@163.com
1. 適用于各種動(dòng)物血液 適用于各種動(dòng)物血液 于各種動(dòng)物血液及骨髓本系列產(chǎn)品檢索：：：： A． 本分離液是敏光型的，在運(yùn)輸和貯藏過(guò)程中應(yīng)在 18℃-25℃避光保存，啟封后置 4 ℃保存避免微生物污染。另外，本品為真空包裝，未啟封前置于 10℃ 以下易出現(xiàn)白色結(jié)晶， 影響分離效果。 B． 待分離的樣本要求新鮮，避免冷凍和冷藏。分離液和所分離樣本一定在 20℃水浴 箱中復(fù)溫 20 分鐘保證分離液和所分離樣本溫度在 20℃±2℃時(shí)分離效果最好，且所有操作 過(guò)程一定要在無(wú)菌條件下進(jìn)行。 C． 由于各品牌離心機(jī)的性能不同，國(guó)內(nèi)南北地區(qū)溫度環(huán)境和四季的差異，可能影響 分離效果，用戶可以調(diào)節(jié)離心轉(zhuǎn)數(shù)，調(diào)節(jié)離心的時(shí)間，摸索最佳的分離條件（具體分離條件 各實(shí)驗(yàn)室自定）。 D． 最好使用無(wú)靜電反應(yīng)的離心管，推薦使用未經(jīng)過(guò)堿處理的玻璃離心管。 E． 最優(yōu)抗凝劑選擇：EDTA、枸櫞酸、肝素。應(yīng)注意在血液稀釋過(guò)程中應(yīng)去除抗凝劑 體積。 F． 分離過(guò)程中所用其他試劑如：羥乙已基淀粉 550、全血及組織稀釋液、細(xì)胞洗滌液及 紅細(xì)胞裂解液等以我公司產(chǎn)品為最優(yōu)選擇，本公司相關(guān)系列產(chǎn)品無(wú)菌、無(wú)病毒、無(wú)支原體、 低內(nèi)毒素水平且無(wú)細(xì)胞毒性，所獲得的細(xì)胞可保持完好的生物活性和完整的細(xì)胞形態(tài)。 4. .. 應(yīng) 4. 用 適用于從動(dòng)物血液或骨髓中分離干細(xì)胞。 5.. . . 產(chǎn)品性能指標(biāo) pH 7.0-7.5 滲透壓 280-340mOsmol/kg 內(nèi)毒素 ≤0.5...EU/ml 無(wú)菌 直接接種培養(yǎng) 14 天后培養(yǎng)基澄清 澄明度及不溶性顆粒物 每 50ml 溶液中含 10μm 以上的不溶性微粒 以上的不溶性微粒 以上的不溶性微粒 20 粒以下含 25μm 以上的不溶性微粒 以上的不溶性微粒 以上的不溶性微粒 5 粒以下 6.. . . 貯藏及保存期限 貯藏及保存期限 18℃-25℃避光保存，有效期兩年。啟封后置 4℃保存，有效期一周。 注：：：：若保證無(wú)微生物污染，啟封后可置 4℃長(zhǎng)期保存。但應(yīng)注意保存溫度較低時(shí)本分離液易出現(xiàn)白色結(jié)晶，影響分離效果。 7. .. 實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備 7. 實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備 A． 試劑 干細(xì)胞分離液、全血及組織稀釋液、細(xì)胞洗滌液、羥乙已基淀粉 550、胎牛血清 B． 器材 玻璃離心管、玻璃滴管 水平轉(zhuǎn)子離心機(jī)、無(wú)菌工作臺(tái) 8.. . . 使用方法說(shuō)明及圖例 使用方法說(shuō)明 A. Ⅰ. 取新鮮抗凝血液或臍帶血與羥乙已基淀粉 550（Cat#aaa：：：：HES----TBD550）按 1:1 比例混合， 37℃反應(yīng) 5-10 分鐘（5ml 以下樣本反應(yīng) 5 分鐘，5ml 以上樣本反應(yīng) 10 分鐘）； Ⅱ. 取新鮮抗凝骨髓，加入一份細(xì)胞洗滌液（Cat#：2010X1118），混勻后以 400g（約 1500 轉(zhuǎn)/分）離心 5 分鐘，棄去上清。沉淀與羥乙已基淀粉 550（Cat#aaa：：：：HES----TBD550） 按 1:1 比例混合，37℃反應(yīng) 5-10 分鐘（5ml 以下樣本反應(yīng) 5 分鐘，5ml 以上樣本反 應(yīng) 10 分鐘）； B. 加入為步驟 A 中所得混合液 1/2 體積的全血及組織稀釋液（Cat#：2010C1119）混勻 20 ℃-30℃自然沉降 20-30 分鐘，吸取上清備用； C. 向步驟 B 中所得上清液中加入為其一倍以上體積的細(xì)胞洗滌液（Cat#：2010X1118）混 勻，以 500g（約 1800 轉(zhuǎn)/分）離心 15 分鐘（半徑 15cm 水平轉(zhuǎn)子），棄去上清保留沉淀 細(xì)胞； D. 向細(xì)胞沉淀中加入全血及組織稀釋液（Cat#：2010C1119）調(diào)整細(xì)胞濃度為 2×1081× 109個(gè)/ml，小心疊加于細(xì)胞分離液之液面上（混合液：分離液=2:1）； E. 以 400g（約 1500 轉(zhuǎn)/分）離心 20 分鐘（半徑 15cm 水平轉(zhuǎn)子）； 此時(shí)，離心管中由上至下分為四層：第一層；為稀釋液層。第二層；為環(huán)狀乳白色含所 需干細(xì)胞層。第三層；為透明分離液層。第四層；為極少數(shù)紅細(xì)胞層。收集第二層細(xì)胞放入 約為其 5-10 倍體積的細(xì)胞洗滌液（Cat#：2010X1118）中，充分混勻后以 500g（約 1800 轉(zhuǎn) /分）離心 15 分鐘。沉淀經(jīng)反復(fù)洗滌 2 次既得所需干細(xì)胞。 F. 為獲得純度更高的干細(xì)胞，在步驟 E 中離心完成后可吸取第二層干細(xì)胞層再與羥乙已基淀粉 550（Cat#aaa：：：：HES----TBD550）按 1:1 比例混勻，20℃-30℃自然沉降 20-30 分鐘，收集上清。只能用于科學(xué)研究，不能用于臨床檢測(cè) 血小板 100-300×109/L（10 萬(wàn)-30 萬(wàn)個(gè)/mm3) 名稱(chēng) 占白細(xì)胞總數(shù)百分比 嗜中性粒細(xì)胞 30%-70% 嗜酸性粒細(xì)胞 0.5%-5% 嗜堿性粒細(xì)胞 0%-1% 淋巴細(xì)胞 20%-40% 白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù) 單核細(xì)胞 3%-8% 干細(xì)胞 約占外周血細(xì)胞數(shù)量3%