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Ficoll 400是通過蔗糖和表氯醇的共聚作用，形成的一種高度支化的、完全非離子的聚合物。Ficoll 400聚合物中富含羥基，所以具有很強的親水性，且極易溶于水。Ficoll 400常被作為密度梯度介質，來分離和隔離真核細胞、細胞器和細菌細胞，以及分離淋巴細胞的穩定劑和分離介質，密度范圍可高達1.2 g/mL。除此之外，在免疫學研究中，Ficoll 400還可被用作半抗原載體。在濃縮透析研究中，Ficoll 400分子量較高，無法穿過透析膜，可作為一種有效地濃縮敏感材料。在生理和細胞穩定中，Ficoll 400可以監測血管中的蛋白質排泄。甚至將Ficoll 400加到電泳液中，充當電解質穩定劑。

Ficoll 400分子量大，與蔗糖相比可透析物質含量較低，因此在Ficoll 400中分離細胞，通常不會滲透細胞膜，可以更好地保持細胞功能和形態。

使用方法

可通過不連續和連續梯度離心Ficoll 400，也可用于單位重力分離。不連續梯度離心優點：

a. Ficoll 400密度的突然變化，意味著在不同密度層之間的界面處的急劇變化條帶中存在分離的細胞。這樣，用移液器就能很容易地移除樣品。

b.密度差異很大的細胞只需用兩個密度層即可快速分離。這是通過選擇密度來實現的，這些密度將阻止一種或多種細胞類型進入較低的相，將這些細胞類型隔離在界面處。

具體密度請參考下表格：

不連續梯度制備：

1.用合適的緩沖溶液或0.25 M的等滲蔗糖溶液配置Ficoll 400，配置的濃度應能分離目標材料，在Ficoll 400中，大多數細胞和細胞器的浮力密度在1.0至1.2 g/mL之間，通常兩層梯度即可。

注：配置好的溶液可以儲存在冰箱中，但應在室溫下使用。

2.將配置好的不同梯度的Ficoll 400放入標準離心管中，制層（約1 cm深），密度最大的層在最下面。

3.小心地將樣品放在最上層，用玻璃棒前輕輕攪拌樣品和最上面的Ficoll 400層消除之間的界面。離心， 在離心過程中，各種顆粒的密度不同將聚集在Ficoll層內或之間。

4.離心后移除各相，取出目的細胞，用合適緩沖液沖洗，稀釋，從分離的細胞和細胞器中除去Ficoll。重復4-5次。

注：

a.可以用蒽酮反應估算樣品中殘留的Ficoll 400量。

b.在某些情況下，可能需要連續或線性密度梯度來分離樣品。對于簡單的分離，可以使用不含梯度的均質Ficoll 400溶液，通過逐步增加離心速度來完成分離。

c.密度梯度單位重力沉降法被廣泛用于分離對離心敏感的細胞。具有相似密度但不同尺寸的細胞也可以用單位重力法有效分離。

室溫運輸。室溫避光保存，有效期至少5年。