無血清細胞凍存液（Serum-free Cell Freezing Medium）

產品貨號：HC01

? 產品描述

本品為無色透明澄清溶液，有粘性，含 10 %DMSO。無細菌、真菌、支原體，pH=7.2~7.8，內毒 素< 1 EU/mL。用于-80℃、-196℃冷凍保存常用細胞系，不含蛋白質和任何動物源成分。

? 產品信息

? 使用說明

1. 準備細胞： 

1.1 檢查并確認細胞沒有真菌、細菌、支原體污染； 

1.2 凍存前的細胞處于增殖旺盛的對數生長期最佳；

1.3 計數待凍存的細胞數量。懸浮細胞應180g離心5~10min后除去培養基，貼壁細胞應消化后 計數，再180g離心去培養基以獲得細胞沉淀。 

2. 細胞凍存： 

2.1 首先確定細胞適宜的凍存密度和體積，計算應使用的細胞凍存液體積； 

注：可使用的凍存密度為 1~10×10 6 /mL，推薦凍存密度為 2~5×10 6 /mL。凍存體積為 0.5~1mL/ 管。

2.2 吸取適量細胞凍存液重懸細胞，使用前產品應當2~8℃預冷。細胞重懸后應當立即分裝至細 胞凍存管； 

2.3 經凍存液重懸后的細胞不能在室溫或2~8℃靜置超過10min 以上，應當盡快將凍存管移入 -80℃低溫冰箱，不采取任何程序降溫措施或使用程序降溫裝置。如果無法立即移入-80℃低溫冰 箱，至少應當先移入低于0℃環境中（如-20℃冰箱）短暫存放10 min 左右，同樣不采取程序降 溫；

2.4 -80℃冰箱過夜后的凍存管，若長期儲存，可移入液氮罐中保存。若短期取用，可于-80℃短 期保存數月，保存時間效果因細胞類型而不同。

注：1.初次使用本產品凍存的細胞類型，應測試保存時間和效果后再使用； 2.參考數據：C3A 細胞以 1×10 6 /mL/管于-80℃保存 12 個月后復蘇，即時活率>90%。

3. 細胞復蘇： 

3.1 先準備室溫或37℃預溫好的完全培養基，其體積為凍存液體積的9倍；

3.2 取出液氮或-80℃中的凍存管，置于37 ℃水浴并不斷輕搖。待剩余1粒米大小的冰塊時，迅 速移出水??；

3.3 立即吸取凍存液至完全培養基中，輕柔吹打3~5次混勻。然后，180g 離心5~10分鐘，獲得細 胞沉淀備用。

4. 注意事項： 

4.1 本產品僅限于專業人員科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得 存放于普通住宅內； 

4.2 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作； 

4.3 分裝后在-20℃冷凍保存，使用前解凍并充分混勻。

  注意：For research and manufacturing use.