蛋白表達純化/多肽合成/多肽標記

蛋白質表達純化

隨著蛋白藥物市場的快速發展和蛋白質組學研究的深入，高純度活性蛋白的需求越來越大。威斯騰生物中心組建了一支由多名具深厚生物技術基礎與制藥企業工作經驗的留學歸國人員和國內專家為核心的團隊?？蔀閲鴥韧饪蛻籼峁幕虻降鞍准兓恼准夹g服務。

威斯騰服務特色

穩定而多樣的表達系統：威斯騰生物已建立整套的基因克隆與表達體系，無論是單個基因的克隆、表達與純化，還是多個基因高通量的基因克隆、表達和純化，均能選用適合您試驗（科研項目）需要的表達系統和合適的表達載體為您提供優質的服務。

多種純化方式：可為客戶提供多種蛋白純化服務，純化方式包括親和層析純化、凝膠過濾、離子交換、疏水層析等，客戶可根據需要選擇合適的純化方式。

專業的團隊和良好的信息管理體系：專業的基因克隆、蛋白表達與純化技術人員與團隊，具有豐富的表達和純化經驗，可為客戶解決各種瓶頸問題, 良好信息管理體系使我們能夠為客戶提供成熟、高效的基因克隆服務。

操作流程

大腸桿菌和酵母蛋白表達系統：

合成基因（另外收費）或者客戶提供

SDS-PAGE檢測表達

Western blot檢測表達（可選）模板(cDNA、基因組DNA、質粒等)

構建表達載體

篩選陽性克隆

表達優化和可溶性分析

提供結果

１、構建的表達載體及測序報告

２、SDS-PAGE結果

３、篩選的表達菌株

４、Western blot結果

５、實驗流程及結果

６、2ml 1.0×108pfu/ml的病毒（利用昆蟲桿狀病毒蛋白表達系統表達時）

穩定表達細胞株（哺乳動物細胞）

多肽合成

威斯騰生物合成多肽采用逐步固相合成方法服務，利用微波技術處理反應體系，可以合成較長的復雜多肽。多肽合成是一個重復添加氨基酸的過程，多肽的一個末端固定在特殊支持物上，通過循環步驟最終形成一條完整的多肽。

肽鏈的設計：

多肽是復雜的大分子，每條序列在物理和化學特性上都是獨特的，研究人員設計多肽時應考慮到合成，純化以及溶解等過程中的難度，從而能夠使用該多肽達到自己的實驗目的。

如何降低肽鏈合成的難度：

減少序列長度

減少疏水性殘基數

減少困難殘基

如何增強肽鏈的可溶性：

改變N端或C端

縮短或加長序列

加入可溶性殘基

通過置換一個或多個殘基改變序列

通過選用不同框架來改變序列

多肽保存：

凍干多肽可在-20度保存或室溫保存??

溶液肽遠比凍干形式不穩定，溶液應為中性PH（5-7）-20度保存。??

為避免樣品的反復凍融，最好分成小樣存放。

多肽的溶解：

大多數多肽的首選溶劑是超純抽氣水，稀乙酸或氨水分別對堿性或酸性多肽的溶解也有幫助。如果這些方法用過后還不溶解的多肽，建議用DMF，脲，guanidiniam,chloride,acetonitnle來溶解。

多肽的用途：

主要用于抗體的制備，多肽疫苗，多肽微注射劑對基因結構與功能關系的研究。本中心提供不同純度的多肽，多粗提產物到98%的醫藥級別，客戶可根據需求進行選擇。

＞80% ：免疫學應用，多克隆抗體制備

＞90%：SAR研究，生物測定

＞95%：NMR，結晶化，體外生物測定

＞98%：NMR，結晶化，敏感的生物測定

服務范圍：

1）普通線性肽，鏈長至189個氨基酸，毫克至克級，純度可達99%
2）簡單修飾肽：免費提供N端乙?；┒缩０坊?/span>
3）復雜修飾肽：脂肽，***酸肽（Ser、Thr、Tyr），環肽（酰胺環、二硫鍵環），熒光標記肽（FAM、FITC），生物素標記肽（BIOTIN）、復合抗原肽（MAP）等 ┄
4）蛋白交聯：KLH，BSA，OVA
5）含特殊氨基酸肽：含有D型氨基酸及各種氨基酸衍生物
6）不同純度范圍（粗肽、＞70%、＞80%、＞90%、＞95%、＞98%、＞99%）

多肽標記

提供同位素、熒光標記、生物素標記

威斯騰實驗服務流程

威斯騰生物服務項目