EGY48酵母感受態(tài)細胞
產(chǎn)品名稱： EGY48酵母感受態(tài)細胞
英文名稱： EGY48酵母感受態(tài)細胞
產(chǎn)品編號： MCC0205
產(chǎn)品價格： null
產(chǎn)品產(chǎn)地： null
品牌商標： Frdbio
更新時間： 2024-02-27T15:50:37
使用范圍： null
- 聯(lián)系人 : 趙經(jīng)理
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EGY48酵母感受態(tài)細胞
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產(chǎn)品編號 |
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
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MCC0205 |
EGY48酵母感受態(tài)細胞 |
100μl*10 |
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Carrier DNA |
5ug/μl；100 μl /-20℃ |
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PEG/LiAc |
5 ml /4℃ |
保存條件：-80℃。
1.產(chǎn)品簡介：
EGY48菌株是LexA系統(tǒng)酵母雙雜實驗用菌株，MATα型，可直接轉(zhuǎn)化質(zhì)粒驗證蛋白互作或篩庫；Transformation marker為： his3，trp1,ura3，報告基因為：LEU2；報告基因UAS (上游激 活序列)來源于LexA op(x6)，只有當Bait和Prey互作時才能啟動LEU2表達。EGY48-LexA系統(tǒng)有三種配套質(zhì)粒：pLexA、pB42AD、 p8op-LacZ。質(zhì)粒pLexA篩選標志為HIS3，用于表達DNA-BD與目 標蛋白(Bait)的融合蛋白；質(zhì)粒pB42AD篩選標志為TRP1，用于表達AD與目標蛋白(Prey)的融合蛋白；報告質(zhì)粒p8op-LacZ篩選 標志為URA3，報告基因為LacZ，報告基因UAS來源于LexA op(x6)，只有當Bait和Prey互作時才能啟動LacZ表達。EGY48感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作，pGBKT7質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率 >104 cfu/μg DNA
基因型：MATα, ura3, his3, trp1, LexAop (x6)-L
2.使用說明：
1).取一支無菌的1.5ml EP管，依次加入預(yù)冷的目的質(zhì)粒1-3μg, .Carrier DNA 10μl(95-100℃ 5min快速冰浴，重復(fù)一次)，100μl冰.上融化的EGY48感受態(tài)細胞，PEG/LiAc 500ul， 輕輕翻轉(zhuǎn)混勻6-8次;
2).30℃ 水浴30min，每10min輕輕翻轉(zhuǎn)混勻6-8次;
3).每支加入20ul的二甲基亞砜; (用于提高轉(zhuǎn)化效率，可不做)
4).42℃水浴15min，每5min輕輕翻轉(zhuǎn)混勻6- 8次;
5).12000rpm瞬時離心棄上清,每支加入1m1的YPD Plus于30℃復(fù)蘇1h; (用于提高轉(zhuǎn)化效率， 可不做)
6).12000rpm瞬時離心棄上清，用100ul 0.9% NaCl 重懸，涂板,30℃培養(yǎng)48 - 96h。
3.注意事項：
1).感受態(tài)細胞最好在冰上融化.
2).PEG溶液在低溫環(huán)境下會析出，請于常溫下完全溶解后使用。
*本試劑僅供實驗室研究使用