CellTrace™ Red CMTPX細胞質紅色熒光探針可以輕易穿透活細胞膜進入細胞內，轉變成不具細胞滲透性的反應產物，發出較強熒光信號。隨著細胞的傳代增殖，該染料會轉移到子細胞而非群體中相鄰的細胞中，同時染料熒光信號至少可以保持72 h，該染料顯示出較理想的示蹤性能。CellTrace™ Red CMTPX染料表現出無毒、穩定、熒光信號持續時間長，且在生理PH環境中有明亮的熒光特性。此外，染料的激發和發射波長分別是E_x=577 nm和E_m=602 nm，發出紅色熒光，可以很好的與發出綠色熒光蛋白GFP一起使用，實現多重熒光檢測。

產品性質

運輸和保存方法

室溫運輸。粉末-25~-15ºC干燥保存，有效期18個月，用DMSO溶解配置成儲存液，建議分裝后-25~-15ºC避光保存，避免反復凍存，有效期6個月。

注意事項

1）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

2）粉末溶解前請先短暫離心，以保證產品在管底。

3）本產品僅用于科研用途，禁止用于人身上。

使用方法

1.儲存液的配制

本品是以粉末形式提供，使用前需將本品回溫至室溫。使用細胞培養級別的無水DMSO，向50 µg粉末加入36 µL的DMSO，充分溶解至終濃度2 mM?？筛鶕未蔚氖褂昧繉Υ嬉悍盅b后放到-20 ºC避光，避免反復凍融。

2.工作液的配制

根據不同的實驗目的使用不同的探針濃度，以下的起始操作條件僅作參考，可根據細胞類型和其他的相關因素如細胞或組織的透化等進行適當調整。

用適當的緩沖液（HHBS\PBS\DPBS等）或者無血清培養基稀釋儲存液至工作液濃度。例如，制備1~20 μM染料工作溶液，通過渦旋混合均勻。

3.染色及檢測

3.1在培養皿/瓶內加入適量的培養基培養細胞，當細胞長至所需豐度，準備離心細胞；

3.2離心細胞，每管大約2~10×10⁵個細胞；

3.3向細胞中加入大約500 μL體積、37 ℃預熱的CellTrace™ Red CMTPX染色工作液，在所使用細胞正常培養條件下避光、孵育細胞15~30 min。（最佳孵育時間需優化）；

3.4染色結束后，吸出染料，用適量的預熱緩沖溶液（例如PBS）清洗細胞2~3次。將細胞細胞重懸于500 μL預熱的緩沖溶液或培養基中，得到2~10×10⁵個細胞；

3.5用熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡、或流式細胞儀（FL1通道）檢測E_x/E_m = 577/602 nm處的熒光信號變化。

注意：

1）該染料適用于貼壁細胞和懸浮細胞；

2）對于細菌細胞染色：細菌過夜生長預處理的營養肉湯中1：800稀釋儲備溶液時，染色是最有效的，也可以使用新鮮牛肉膏或PBS稀釋。細菌懸浮液可以用PBS稀釋至每毫升10⁵~10⁷個生物。可以將1 mL細菌溶液加到0.45 μm過濾器（25 mm）并真空過濾除去溶液，然后加入1 mL染料溶液并在室溫下孵育5~10 min染色細菌。

HB230217