慢病毒相關(guān)服務(wù)
產(chǎn)品名稱： 慢病毒相關(guān)服務(wù)
英文名稱： saierbio
產(chǎn)品編號(hào)：
產(chǎn)品價(jià)格： 請(qǐng)見(jiàn)具體說(shuō)明
產(chǎn)品產(chǎn)地： null
品牌商標(biāo)： null
更新時(shí)間： null
使用范圍： null
- 聯(lián)系人 :
- 地址 : 天津市津南區(qū)小站鎮(zhèn)黃臺(tái)工業(yè)園嘉園道8號(hào)（華若英）
- 郵編 : 300353
- 所在區(qū)域 : 天津
- 電話 : 150****0053 點(diǎn)擊查看
- 傳真 : 點(diǎn)擊查看
- 郵箱 : info@saierbio.com
我們將采取分步收費(fèi)的方式，即按照所提供的構(gòu)建，重組，包裝，擴(kuò)增及純化的一系列不同的服務(wù)，根據(jù)客戶的實(shí)際需要，對(duì)每項(xiàng)服務(wù)進(jìn)行具體的核算。客戶如需檢測(cè)其目的基因表達(dá)所需費(fèi)用另行核算。如需要篩選穩(wěn)定細(xì)胞株的客戶需選擇符合自己需要的細(xì)胞株（可以自行提供）
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服務(wù)項(xiàng)目 |
周期(天) |
參考報(bào)價(jià) |
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構(gòu)建 |
14 |
詢價(jià) |
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???1.合成基因(可選，費(fèi)用另算) | ||
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轉(zhuǎn)染和插入基因檢測(cè) |
7 |
詢價(jià) |
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???1.轉(zhuǎn)染至 | ||
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病毒包裝 |
30-40 |
詢價(jià) |
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???1.細(xì)胞培養(yǎng) | ||
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病毒純化 |
2 |
詢價(jià) |
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???1.超速離心 | ||
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QC |
30 |
詢價(jià) |
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???1. qPCR滴度檢測(cè) |
?三、交付結(jié)果：
◆ 插入慢病毒載體中目的基因的測(cè)序報(bào)告
◆ 提供構(gòu)建好的慢病毒載體質(zhì)粒（4ug），并附上酶切或PCR鑒定結(jié)果
◆ 對(duì)于需要獲得病毒的客戶，我們將提供1ml 含106-107病毒的濃縮后病毒液，并附上一份QC報(bào)告
◆ 對(duì)于需要通過(guò)慢病毒獲得穩(wěn)定細(xì)胞株的客戶，我們將提供106數(shù)量的細(xì)胞，并附上一份QC報(bào)告
慢病毒(Lentivirus)介導(dǎo)的siRNA活體實(shí)驗(yàn)用病毒轉(zhuǎn)染服務(wù)
慢病毒表達(dá)載體包含了包裝、轉(zhuǎn)染、穩(wěn)定整合所需要的遺傳信息。慢病毒包裝質(zhì)粒可提供所有的轉(zhuǎn)錄并包裝RNA到重組的假病毒載體所需要的所有輔助蛋白。為產(chǎn)生高滴度的病毒顆粒，需要利用表達(dá)載體和包裝質(zhì)粒同時(shí)共轉(zhuǎn)染細(xì)胞，在細(xì)胞中進(jìn)行病毒的包裝，包裝好的假病毒顆粒分泌到細(xì)胞外的培養(yǎng)基中，離心取得上清液后，可以直接用于宿主細(xì)胞的感染，目的基因進(jìn)入到宿主細(xì)胞之后，經(jīng)過(guò)反轉(zhuǎn)錄，整合到基因組，從而高水平的表達(dá)效應(yīng)分子。
本公司使用的慢病毒表達(dá)系統(tǒng)，它由三部分組成：
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慢病毒表達(dá)載體 |
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慢病毒包裝質(zhì)粒 |
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可產(chǎn)生假病毒顆粒的細(xì)胞系 |
服務(wù)流程
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根據(jù)目的基因相關(guān)信息（序列，序列號(hào)等），利用高效的設(shè)計(jì)軟件，設(shè)計(jì) siRNA序列，針對(duì)每條目的基因，我們?cè)O(shè)計(jì)3條siRNA序列，其中1條序列為陰性對(duì)照組； |
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根據(jù)設(shè)計(jì)好的 siRNA序列，設(shè)計(jì)，合成兩條互補(bǔ)的短片段的DNA； |
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對(duì)合成好的 DNA片段進(jìn)行稀釋，退火，連接到線形化處理過(guò)的載體，轉(zhuǎn)化，涂平板，過(guò)夜培養(yǎng)； |
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通過(guò) PCR的方法篩選陽(yáng)性菌落，進(jìn)行測(cè)序，分析測(cè)序結(jié)果； |
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對(duì)于測(cè)序正確的重組質(zhì)粒，提取和純化高質(zhì)量的不含內(nèi)毒素的 siRNA病毒穿梭質(zhì)粒； |
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利用構(gòu)建好的質(zhì)粒做轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)， 48小時(shí)后通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量和Western的方法分析目的基因，篩選出一條最有效的siRNA序列； |
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篩選出的高效重組載體和病毒包裝質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染 293T細(xì)胞，進(jìn)行病毒包裝和生產(chǎn)，收集病毒液； |
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濃縮、純化病毒液，測(cè)定滴度； |
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提供高質(zhì)量的病毒液給客戶（對(duì)于活體實(shí)驗(yàn)，我們提供的病毒基本單位為 1×108ifu ，這個(gè)單位為一只小鼠一次實(shí)驗(yàn)的平均用量） |