Transwell細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)/流式細(xì)胞周期檢測(cè)/Tunel檢測(cè)細(xì)胞凋亡/細(xì)胞克隆/細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)
產(chǎn)品名稱： Transwell細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)/流式細(xì)胞周期檢測(cè)/Tunel檢測(cè)細(xì)胞凋亡/細(xì)胞克隆/細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)
英文名稱： Western Biotechnology Inc
產(chǎn)品編號(hào)：
產(chǎn)品價(jià)格： 歡迎來(lái)電詳詢023-65316016，023—65316556
產(chǎn)品產(chǎn)地： null
品牌商標(biāo)： null
更新時(shí)間： 2023-07-31T09:56:51
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- 聯(lián)系人 : 張老師
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Transwell細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞遷移與侵襲實(shí)驗(yàn)將Transwell小室放入培養(yǎng)板中，小室內(nèi)稱上室，培養(yǎng)板內(nèi)稱下室，上下層培養(yǎng)液以聚碳酸酯膜相隔，將研究的細(xì)胞種在上室內(nèi)，由于聚碳酸酯膜有通透性，下層培養(yǎng)液中的成分可以影響到上室內(nèi)的細(xì)胞，應(yīng)用不同孔徑和經(jīng)過(guò)不同處理的聚碳酸酯膜，就可以進(jìn)行共培養(yǎng)、細(xì)胞趨化、細(xì)胞遷移、細(xì)胞侵襲等多種方面的研究。
實(shí)驗(yàn)步驟：
材料準(zhǔn)備：
可拍照顯微鏡，Transwell小室，孔徑8μm，沒(méi)包被膠的(Coster和Corning公司的也較常用)，Transwell遷移實(shí)驗(yàn)的細(xì)胞培養(yǎng)板24孔板。細(xì)胞培養(yǎng)板應(yīng)當(dāng)與購(gòu)買的Transwell小室相配套，BD公司的Matrigel，無(wú)血清DMEM，(1%胎牛血清)DMEM和1640培養(yǎng)基，DMEM完全培養(yǎng)基，1640完全培養(yǎng)基（也可加到20%血清），無(wú)菌PBS，棉簽，胰酶，4%多聚甲醛固定液或者甲醇，結(jié)晶紫染液（0.1%（g/ml）PBS結(jié)晶紫）
步驟和流程
基質(zhì)膠鋪板：
用BD公司的Matrigel?1：8（根據(jù)細(xì)胞產(chǎn)生mmp的量來(lái)決定）稀釋，包被Transwell小室底部膜的上室面，置37℃30min使Matrigel聚合成凝膠。使用前進(jìn)行基底膜水化。
制備細(xì)胞懸液
①制備細(xì)胞懸液前可先讓細(xì)胞撤血清饑餓12－24h，進(jìn)一步去除血清的影響。但這一步并不是必須的。
②消化細(xì)胞，終止消化后離心棄去培養(yǎng)液，（用PBS洗1－2遍），用含BSA的無(wú)血清培養(yǎng)基重懸。調(diào)整細(xì)胞密度至5×105/ml。
接種細(xì)胞
①取細(xì)胞懸液100μl加入Transwell小室。
②?24孔板下室一般加入600μl含20%PBS的培養(yǎng)基，特別注意的是，下層培養(yǎng)液和小室間常會(huì)有氣泡產(chǎn)生，一旦產(chǎn)生氣泡，下層培養(yǎng)液的趨化作用就減弱甚至消失了，在種板的時(shí)候要特別留心，一旦出現(xiàn)氣泡，要將小室提起，去除氣泡，再將小室放進(jìn)培養(yǎng)板。
③培養(yǎng)細(xì)胞：常規(guī)培養(yǎng)12－48h（主要依癌細(xì)胞侵襲能力而定）。24h較常見(jiàn)，時(shí)間點(diǎn)的選擇除了要考慮到細(xì)胞細(xì)胞侵襲力外，處理因素對(duì)細(xì)胞數(shù)目的影響也不可忽視。
結(jié)果統(tǒng)計(jì)
直接計(jì)數(shù)法，“貼壁”細(xì)胞計(jì)數(shù)，這里所謂的“貼壁”是指細(xì)胞穿過(guò)膜后，可以附著在膜的下室側(cè)而不會(huì)掉到下室里面去，通過(guò)給細(xì)胞染色，可在鏡下計(jì)數(shù)細(xì)胞。
取出Transwell小室，棄去孔中培養(yǎng)液，用無(wú)鈣的PBS洗2遍，甲醇固定30分鐘，將小室適當(dāng)風(fēng)干。
0.1%結(jié)晶紫染色20?min，用棉簽輕輕擦掉上層未遷移細(xì)胞，用PBS洗3遍。
400倍顯微鏡下隨即五個(gè)視野觀察細(xì)胞，記數(shù)。
實(shí)驗(yàn)周期：
1個(gè)月
威斯騰生物服務(wù)流程
威斯騰生物服務(wù)項(xiàng)目
| 分子生物學(xué)檢測(cè) | 蛋白質(zhì)與免疫學(xué) | 動(dòng)物實(shí)驗(yàn) |
| 實(shí)時(shí)熒光定量PCR | 單克隆抗體制備 | 帕金森疾病模型 |
| 免疫共沉淀（Co-IP） | 多克隆抗體制備 | 抑郁癥動(dòng)物模型 |
| ELISA（酶聯(lián)免疫吸附法）技術(shù) | Western-blot?實(shí)驗(yàn)服務(wù) | 脊髓損傷模型 |
| 生化指標(biāo)檢測(cè) | 蛋白雙向電泳實(shí)驗(yàn)服務(wù) | 腦外損傷模型 |
| 雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè) | 原核蛋白表達(dá)純化 | 骨神經(jīng)損傷模型 |
| 染色質(zhì)免疫共沉淀（ChIP） | 真核蛋白表達(dá)純化 | 心肌缺血模型 |
| GST?pull?Down | ITRAQ定量蛋白質(zhì)組學(xué) | 心力衰竭模型 |
| SLAC蛋白組學(xué) | 肺動(dòng)脈高血壓動(dòng)物模型 | |
| 高血壓模型 | ||
| 病毒包裝 | 實(shí)驗(yàn)課題整體外包 | 粥樣動(dòng)脈硬化模型 |
| 過(guò)表達(dá)/干擾慢病毒包裝純化 | 整體課題外包 | 大腦中動(dòng)脈阻塞模型 |
| 過(guò)表達(dá)/干擾腺病毒包裝純化 | 細(xì)胞整體實(shí)驗(yàn)外包 | 慢性之氣管炎模型 |
| 逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝純化 | 動(dòng)物整體實(shí)驗(yàn)外包 | 過(guò)敏性哮喘模型 |
| 腺相關(guān)病毒包裝純化 | 肺炎大鼠模型 | |
| 肝炎-肝硬化-肝癌模型 | ||
| 蛋白芯片 | 原代細(xì)胞培養(yǎng) | 肝纖維化模型 |
| 細(xì)胞因子芯片 | 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng) | 膽結(jié)石模型 |
| BioPlex懸浮芯片 | 脂肪干細(xì)胞培養(yǎng) | 急性胰腺炎模型 |
| 生長(zhǎng)因子芯片 | 心肌成纖維細(xì)胞培養(yǎng) | 急性腎衰竭模型 |
| 炎癥因子芯片 | 軟骨細(xì)胞培養(yǎng) | 體內(nèi)血栓模型 |
| 血管生成因子芯片 | 血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng) | 關(guān)節(jié)炎模型 |
| 凋亡因子芯片 | 神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng) | I型和II型糖尿病模型 |
| 趨化因子芯片 | 內(nèi)皮組細(xì)胞原代培養(yǎng) | 裸鼠成瘤 |
| HuProt?TM?20K人類蛋白組芯片 | 基因編輯動(dòng)物 | |
| 電生理相關(guān)服務(wù) | 動(dòng)物整體實(shí)驗(yàn)服務(wù) | |
| 膜片鉗實(shí)驗(yàn) | ||
| 細(xì)胞生物學(xué)檢測(cè) | 高通量測(cè)序 | 代謝組學(xué) |
| 細(xì)胞原代培養(yǎng) | mRNA測(cè)序 | 氣相色譜GC/MS |
| MTT檢測(cè) | LncRNA測(cè)序 | 液相色譜LC/MS |
| 細(xì)胞凋亡檢測(cè) | 全基因組測(cè)序 | 核磁共震NMR |
| 細(xì)胞周期檢測(cè) | RNA-Seq測(cè)序 | |
| 細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn) | 外顯子測(cè)序 | 影像學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn) |
| Transwell細(xì)胞遷移/侵襲 | 16s擴(kuò)增子測(cè)序 | Micro-CT |
| 流式分選 | Small?RNA測(cè)序 | 小動(dòng)物活體成像 |
| CCK8/XTT檢測(cè) | 宏基因組測(cè)序 | 核磁共振 |
| 臺(tái)盼藍(lán)檢測(cè)細(xì)胞活性 | 單細(xì)胞測(cè)序 | PET-CT |
| 藥物篩選細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn) | circleRNA測(cè)序 | |
| 細(xì)胞粘附性檢測(cè) | 甲基化測(cè)序 | 基因編輯動(dòng)物 |
| 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn) | 條件性敲除小鼠/大鼠 | |
| 細(xì)胞生物學(xué)整體實(shí)驗(yàn) | 全基因敲除小鼠/大鼠 | |
| 細(xì)胞成管實(shí)驗(yàn) | ||
| 病理檢測(cè) | CRISPR/Cas9細(xì)胞敲除/敲入 | 基因芯片 |
| 掃描電鏡 | 基因定點(diǎn)突變細(xì)胞系 | LncRNA芯片 |
| 透射電鏡 | 單基因敲除細(xì)胞系 | miRNA芯片 |
| HE染色 | 多基因敲除細(xì)胞系 | mRNA芯片 |
| 免疫組化 | 目的基因敲入細(xì)胞系 | 甲基化芯片（限人和小鼠來(lái)源樣本） |
| Tunel（原位末端凋亡法）檢測(cè) | 報(bào)告基因敲入細(xì)胞系 | SNP芯片（限人和小鼠來(lái)源樣本） |
| 激光共聚焦 | miRNA/LncRNA敲除細(xì)胞系 | |
| 免疫熒光 | ||
| Masson染色 | CRISPR/Cas9動(dòng)物敲除/敲入 | 科研設(shè)計(jì)指導(dǎo)&文章評(píng)估/潤(rùn)色 |
| 原位雜交 | 基因敲除大鼠/小鼠 | 科研文獻(xiàn)論著翻譯 |
| 熒光原位雜交 | 基因敲入大鼠/小鼠 | 論文翻譯潤(rùn)色服務(wù) |
| 特殊染色（PSA、茜素紅、阿爾新藍(lán)等） | 臨床實(shí)驗(yàn)/科研實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案指導(dǎo) | |
| 行為學(xué)檢測(cè) | 藥物篩選服務(wù)項(xiàng)目 | 藥效學(xué)評(píng)價(jià) |
| 曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn) | 高通量自動(dòng)藥物篩選平臺(tái) | 抗腫瘤藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià) |
| 重復(fù)性刻板行為檢測(cè) | 細(xì)胞高內(nèi)涵藥物篩選平臺(tái) | 心血管系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià) |
| 動(dòng)物跑臺(tái)檢測(cè) | 蛋白質(zhì)組學(xué)靶標(biāo)研發(fā)平臺(tái) | 泌尿系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià) |
| 強(qiáng)迫游泳 | 分子藥理研究平臺(tái) | 內(nèi)分泌系統(tǒng)藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià) |
| 生物膜片鉗藥物篩選平臺(tái) | 抗炎免疫藥物藥效學(xué)評(píng)價(jià) | |
| 常規(guī)藥物體, , 外篩選 |
【本平臺(tái)合作項(xiàng)目】
分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、基因敲出/入、模式動(dòng)物、SPF動(dòng)物保種、病理學(xué)檢測(cè)、免疫學(xué)檢測(cè)、影像學(xué)檢測(cè)、原代培養(yǎng)、細(xì)胞藥篩、CRISPR/Cas9基因編輯、基因芯片、高通量測(cè)序、蛋白組學(xué)、代謝組學(xué)、高通量高內(nèi)涵篩選、藥效學(xué)評(píng)價(jià)、藥理毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)、慢病毒包裝與穩(wěn)轉(zhuǎn)株建立、SiRNA與納米載藥、ChIP、CO-IP、生物信息學(xué)分析、知識(shí)產(chǎn)權(quán)服務(wù)！?
【全國(guó)免費(fèi)熱線】400-675-6758
【電話】?023-65316016,023-65316556
【郵箱】?china-western@163.com
【官網(wǎng)網(wǎng)址】www.cqwestern.com
【地址】?重慶市高新區(qū)二郎創(chuàng)業(yè)大道高科創(chuàng)業(yè)園D棟2樓?