AAV相關(guān)病毒包裝服務(wù)
產(chǎn)品名稱： AAV相關(guān)病毒包裝服務(wù)
英文名稱： AAV相關(guān)病毒包裝服務(wù)
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AAV相關(guān)病毒包裝服務(wù)
腺相關(guān)病毒（Adeno-Associated Viral Vector，AAV）屬于微小病毒科( parvovirus)，為無包膜的單鏈線狀 DNA 病毒。AAV 的基因組約 4700bp，包括上下游兩個(gè)開放讀碼框架(ORF)，位于分別由 145 個(gè)核苷酸組成的 2 個(gè)反向末端重復(fù)序列(ITR)之間。 由于腺相關(guān)病毒具有宿主范圍廣、安全性高、免疫原性低、表達(dá)穩(wěn)定和物理性質(zhì)穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn)，已被廣泛地應(yīng)用于基礎(chǔ)研究和臨床試驗(yàn)中，并且腺相關(guān)病毒載體已成為世界上最常用的基因治療載體之一。
AAV病毒特點(diǎn)
1.安全性高，目前還沒有發(fā)現(xiàn)AAV對(duì)人體致病；每10個(gè)人中就有8個(gè)人在一生中會(huì)感染AAV，而rAAV更是去除了96%的AAV基因組，進(jìn)一步確保了安全性。目前唯一通過歐盟藥監(jiān)局的基因治療藥物Glybera也是一種rAAV。
2.免疫原性低：當(dāng)AAV用局部大劑量感染肌肉、腦、眼等組織時(shí)，很少有感染上的細(xì)胞之后被免疫系統(tǒng)所清除。這種特性對(duì)于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)上顯然極有幫助。
3.感染譜廣：幾乎所有處于分裂期和靜止期的細(xì)胞都可以使用AAV來感染。
4.表達(dá)時(shí)間長(zhǎng)：rAAV可在宿主細(xì)胞中形成附加體（episome）存在于細(xì)胞核中，在細(xì)胞分裂不旺盛的組織中可持續(xù)表達(dá)5個(gè)月以上。
5.擴(kuò)散性強(qiáng)：rAAV具有遠(yuǎn)高于腺病毒和慢病毒的擴(kuò)散性，可以穿透血腦屏障，是最理想的神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞感染工具。
6.高穩(wěn)定性：rAAV病毒可使用冰袋運(yùn)輸，并且對(duì)氯仿等試劑具有抗性
7.特異性強(qiáng)：rAAV有十?dāng)?shù)種常用的血清型，不同的血清型對(duì)不同的臟器有較高的識(shí)別及感染能力。
樞密科技采用2套rAAV制備方法：
1.AAV無輔助病毒系統(tǒng)(AAV Helper-Free System)：
該系統(tǒng)利用已經(jīng)明確與調(diào)節(jié)AAV復(fù)制和表達(dá)的腺病毒基因產(chǎn)物，并且將這些基因產(chǎn)物通過轉(zhuǎn)染引進(jìn)宿主細(xì)胞。在AAV Helper-Free System中，生產(chǎn)具感染性的AAV病毒顆粒所需的腺病毒基因產(chǎn)物(例如：E2A，E4和VA RNA基因)大部分由與其他質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染進(jìn)細(xì)胞的pHelper質(zhì)粒提供，其余的腺病毒基因產(chǎn)物由穩(wěn)定表達(dá)腺病毒E1基因的AAV-293宿主細(xì)胞提供。AAV-293細(xì)胞是經(jīng)過改良HEK293腺相關(guān)病毒生產(chǎn)能力而衍生出的亞克隆細(xì)胞系。由于不再需要活的輔助病毒，AAV Helper-Free System提供一個(gè)更安全，更便利的替代逆轉(zhuǎn)錄病毒和腺病毒的基因傳遞系統(tǒng)。
2.新型桿狀病毒系統(tǒng)制備rAAV的方法：
該系統(tǒng)可通過穿梭載體靈活裝載外源基因的片段，并在細(xì)菌內(nèi)高效重組到桿狀病毒基因組上。再將抽提出的重組桿狀病毒基因組DNA經(jīng)轉(zhuǎn)染Sf9昆蟲細(xì)胞，產(chǎn)生有感染活性的重組桿狀病毒。然后，利用重組桿狀病毒（BEV）感染懸浮培養(yǎng)的Sf9細(xì)胞生產(chǎn)rAAV。新型桿狀病毒系統(tǒng)靈活性高、通用性強(qiáng)、病毒質(zhì)量高、產(chǎn)量高，適于大規(guī)模放大生產(chǎn)，rAAV純化后能夠達(dá)到很高的純度，生物安全性高。
AAV載體不同血清型
研究發(fā)現(xiàn) AAV 具有多種血清型，各種不同血清型的 AAV 載體的主要區(qū)別是衣殼蛋白不同，因此對(duì)不同的組織和細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率存在差異。目前樞密科技提供有12種不同的 AAV 血清型可供客戶選擇，建議客戶針對(duì)不同組織器官選擇相應(yīng)血清型的 AAV 病毒，見下表。
??12種不同血清型AAV對(duì)各組織器官細(xì)胞的親和性?
AAV誘導(dǎo)凋亡與抑制相關(guān)產(chǎn)品及貨號(hào)
AAV化學(xué)遺傳相關(guān)產(chǎn)品及貨號(hào)
AAV光抑制相關(guān)產(chǎn)品及貨號(hào)
