NCI-H460 人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞/NCI-H460/NCI-H460細(xì)胞
產(chǎn)品名稱： NCI-H460 人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞/NCI-H460/NCI-H460細(xì)胞
英文名稱： NCI-H460
產(chǎn)品編號： iCell-h160
產(chǎn)品價格： 1350
產(chǎn)品產(chǎn)地： 上海
品牌商標(biāo)： iCell
更新時間： 2026-06-25T13:45:21
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<p><span style="font-size: 20px;"><strong>細(xì)胞介紹</strong></span></p> <p><span style="font-size: 20px;"> 該細(xì)胞1982年由A.F. Gazdar建系，源自一位患有大細(xì)胞肺癌的男性的胸腔積液。該細(xì)胞角蛋白、波形蛋白陽性。</span></p> <p><span style="font-size: 20px;"><strong>細(xì)胞特性</strong></span></p> <p><span style="font-size: 20px;">1） 來源：肺癌</span></p> <p><span style="font-size: 20px;">2） 形態(tài)：上皮細(xì)胞樣，貼壁生長</span></p> <p><span style="font-size: 20px;">3） 含量：>1x10^6 細(xì)胞數(shù)</span></p> <p><span style="font-size: 20px;">4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝</span></p> <p><span style="font-size: 20px;">5) 用途：僅供科研使用。</span></p> <p><span style="font-size: 20px;"><strong>運輸和保存</strong></span></p> <p><span style="font-size: 20px;"><strong>干冰運輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞</strong></span></p> <p><span style="font-size: 20px;">（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。</span></p> <p><span style="font-size: 20px;">（2）T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。</span></p> <p><span style="font-size: 20px;"><strong>細(xì)胞接收后的處理</strong></span></p> <p><span style="font-size: 20px;">1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。</span></p> <p><span style="font-size: 20px;">2）請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。</span></p> <p><span style="font-size: 20px;">3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達70%-80%以上，可以對細(xì)胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。</span></p> <p><span style="font-size: 20px;">4）<strong>備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。</strong> </span></p> <p><span style="font-size: 20px;"><strong>一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：</strong></span></p> <p><span style="color: #c00000; font-size: 20px;"><strong>1) 準(zhǔn)備1640 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 (iCell-0002) 87 %</strong></span></p> <p><span style="color: #c00000; font-size: 20px;"><strong> 優(yōu)質(zhì)胎牛血清 10 %</strong></span></p> <p><span style="color: #c00000; font-size: 20px;"><strong> P/S青霉素-鏈霉素 1%</strong></span></p> <p><span style="color: #c00000; font-size: 20px;"><strong> GlutaMAX-1谷氨酰胺 ( iCell-0900 ) 1%</strong></span></p> <p><span style="color: #c00000; font-size: 20px;"><strong> Sodium Pyruvate丙酮酸鈉 ( iCell-01100 ) 1%</strong></span></p> <p><span style="color: #c00000; font-size: 20px;"><strong>2) 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。</strong></span></p> <p><span style="font-size: 20px;">3) 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。</span></p> <p><span style="font-size: 20px;"><strong>二．細(xì)胞處理：</strong></span></p> <p><span style="font-size: 20px;"><strong>1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：</strong></span></p> <p><span style="font-size: 20px;">將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。</span></p> <p><span style="font-size: 20px;">2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。</span></p> <p><span style="font-size: 20px;"><strong>對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：</strong></span></p> <p><span style="font-size: 20px;">1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。</span></p> <p><span style="font-size: 20px;">2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。 </span></p> <p><span style="font-size: 20px;">3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。</span></p> <p><span style="font-size: 20px;">3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實驗使用。</span></p> <p><span style="font-size: 20px;"><strong>下面T25瓶為例；</strong></span></p> <p><span style="font-size: 20px;">1. 細(xì)胞凍存時按照細(xì)胞傳代的過程收集消化好的細(xì)胞到離心管中，可使用血球計數(shù)板計數(shù)，來決定細(xì)胞的凍存密度。一般細(xì)胞的推薦凍存密度為1×10^6~1×10^7個活細(xì)胞/ml.</span></p> <p><span style="font-size: 20px;">2. 1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配制好的細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞 ，按每1ml凍存液含1×10^6~1×10^7個活細(xì)胞/ml分配到一個凍存管中將細(xì)胞分配到凍存管中，標(biāo)注好名稱、代數(shù)、日期等信息。</span></p> <p><span style="font-size: 20px;">3. 將要凍存的細(xì)胞置于程序降溫盒中，-80度冰箱中過夜，之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。</span></p>