產品描述

DAPI，也稱DAPI dihydrochloride，是一種常用的核酸染料，可以和雙鏈DNA富含AT序列的小溝結合，產生比自身強20多倍的藍色熒光。和EB(ethidium bromide)相比，DAPI對雙鏈DNA的染色靈敏度要高很多倍。DAPI也可對RNA進行染色，染色機理是其可以選擇性嵌入“AU序列”并發出熒光。相比DAPI-dsDNA(Ex/Em=358 nm/461 nm)，DAPI-RNA具有較長的最大發射波長(500 nm)，其熒光亮度僅有DAPI-dsDNA的20%。

盡管DAPI不能通過活細胞膜，但可以通過提高濃度使之進入活細胞。DAPI具有很高的光漂白承受水平，能用來檢測酵母線粒體DNA，葉綠體DNA，病毒DNA，Microplasm DNA以及染色體DNA。

DAPI典型的藍色熒光特性使其非常普遍的搭配其他綠色、黃色或紅色熒光染料用于細胞生物學多色熒光標記技術，因此也常作為核酸和染色體的復染劑用于細胞凋亡檢測、RNA原位雜交、直接或間接免疫檢測等領域，其染色后可用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。

本產品為溶液，濃度為5 mg/mL。另外提供粉末形式的DAPI（Cat No. 40727ES10）供客戶選購。
 

產品性質

運輸與保存方法
冰袋運輸，5 mg/mL的DAPI儲存液于-20ºC避光保存，1年有效。
 

注意事項

1）DAPI對人體有一定刺激性，請注意適當防護。

2）熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡量當天完成檢測。

3）為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。

4）低濃度的DAPI不容易穿透細胞膜。

5）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

6）本產品僅作科研用途！
 

使用方法

1. 配制工作液：
用雙蒸水或PBS稀釋母液，配制成所需要的工作的濃度（0.5-10 μg/mL）。

2. 固定的細胞或組織染色：

對于固定的細胞或組織樣品，固定后，適當洗滌去除固定劑。DAPI染色通常在其他染色的最后進行。如果不需要進行其它染色，則直接進行DAPI 染色。

a) 對于貼壁細胞或組織切片：加入適量DAPI染色液，覆蓋住樣品即可。

b) 對于懸浮細胞：至少加入待測染色樣品體積3倍的染色液，混勻。室溫放置3-5分鐘。

c) 吸除DAPI染色液，用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次，每次3-5分鐘。

d) 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發波長360 nm，發射波長460 nm。

3. 活細胞或組織染色：

a) 細胞培養物中加入適量DAPI染色液，約1/10細胞培養基體積，必須充分覆蓋住待染色的樣品。通常對于六孔板一個孔需加入1 mL染色液，對于96孔板一個孔需加入100 μL染色液。 

b) 在37℃培養細胞 10～20 分鐘。

c) 用 PBS或合適的緩沖液洗細胞兩次。

d) 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發波長360 nm，發射波長460 nm。

相關產品

HB200211