DextrinBeads6FF的重力柱
產(chǎn)品名稱： DextrinBeads6FF的重力柱
英文名稱：
產(chǎn)品編號： YA2510-1x1mL
產(chǎn)品價格： 0
產(chǎn)品產(chǎn)地： 中國 北京索萊寶
品牌商標： solarbio
更新時間： 2026-04-10T08:58:12
使用范圍： null
- 聯(lián)系人 : 索萊寶-龔思雨
- 地址 : 北京市北京經(jīng)濟技術開發(fā)區(qū)環(huán)科中路16號26幢3層301
- 郵編 :
- 所在區(qū)域 : 北京
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Dextrin Beads 6FF的重力柱
貨號：YA2510
規(guī)格：1x1mL/1x5mL/5x1mL/3x1mL+1x5mL/5x5mL
保存：2°C - 8°C
產(chǎn)品介紹
Dextrin Beads 6FF是一種純化帶有麥芽糖結合蛋白（MBP）標簽蛋白的親和層析介質(zhì)。MBP 可促進連接蛋白的正確折疊，增加在細菌中過量表達的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。Dextrin Beads 6FF 可以一步純化 MBP 融合蛋白，結合的融合蛋白可以用 10mM 麥芽糖進行溫和洗脫，保護了標簽蛋白的活性。如果要去除 MBP 融合部分可用位點特異性蛋白酶切除。
Dextrin Beads 6FF 重力柱以Dextrin Beads 6FF 為裝填材料，提供 1mL和 5mL兩種規(guī) 格產(chǎn)品，方便客戶使用，操作簡單，純化效率高。
產(chǎn)品性能（僅供參考）
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性能 |
指標 |
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基質(zhì) |
高度交聯(lián)的 6%瓊脂糖微球 |
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配體 |
糊精 |
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載量（/mL介質(zhì)） |
>10 mg MBP 蛋白(80 kDa) |
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粒徑 (μm) |
45-165 |
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最大流速 |
0.3 MPa, 3 bar |
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pH穩(wěn)定范圍 |
3-12 |
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儲存緩沖液 |
含20%乙醇的1x PBS |
基本操作信息（僅供參考）?
1 緩沖液的準備：
所用水和緩沖液在使用之前建議用 0.22μm 或 0.45μm 濾膜過濾。
1）平衡/ 洗雜液: 20mM Tris-HCl，200mM NaCl，1mM EDTA，pH7.4
2）洗脫液: 20 mM Tris-HCl，1mM EDTA，10mM 麥芽糖，pH7.4
注意: 平衡液和洗脫液中可加入 1mM DTT 或 10mM β–巰基乙醇
2 樣品準備：
樣品在上樣前建議離心或用 0.22μm 或 0.45μm 濾膜過濾，減少雜質(zhì)，提高蛋白純化效率和防止堵塞柱子。
3 樣品純化：
柱子平衡——上樣——洗雜——洗脫
4 ?SDS-PAGE 檢測：
將使用純化產(chǎn)品得到的樣品（包括流出組分、洗雜組分和洗脫組分）以及原始樣品使用 SDS-PAGE 檢測純化效果。
5 ?填料清洗
Dextrin Beads 6FF 純化產(chǎn)品可以重復使用而無需再生，但隨著非特異性結合的蛋白的增多和蛋白的聚集，往往造成流速和結合載量都下降，這時可按照下面方法對樹脂進行清洗。
3?倍柱體積的去離子水；
3 倍柱體積的 0.1% SDS 或 0.5M NaOH 溶液；
3 倍柱體積去離子水，20%乙醇 4-30 度保存。
常見問題及解決方案（僅供參考）
1.?柱子反壓過高：
可能是填料被堵塞，可以進行樹脂清洗；或者是由于裂解液中含有微小的固體顆粒，建議上柱前使用濾膜 (0.22或 0.45μm) 過濾，或者離心去除。
2.?目的蛋白沒有吸附：
1)?目的蛋白未表達，需要確保目的蛋白表達；
2)?樣品或緩沖液中存在一些干擾因素如非離子去污劑，可以將樣品透析或用平衡液稀釋；
3)?細胞產(chǎn)生大量的淀粉酶影響結合力，可以在培養(yǎng)基中添加葡萄糖，抑制淀粉酶的表達；
4)?融合蛋白使麥芽糖結合位點阻塞或扭曲，影響了目的蛋白的結合力，此時建議更換載體；
5)?柱子結合時間太短，建議將樣品與Dextrin Beads 6FF振蕩孵育4度2小時或更長時間。
3.?洗脫樣品較雜：
1)?目的蛋白降解，可以加一些蛋白酶抑制劑，如PMSF、EDTA等
2)?平衡/洗雜不充分，建議增加平衡液體積，確保樹脂充分平衡/洗雜，如樹脂太臟，則按照進行填料清洗。
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