羅氏 LightCycler 480 II（384 孔）是專為高通量分子檢測設計的旗艦級實時熒光定量 PCR（qPCR）平臺。它通過模塊化銀質熱循環與全板同步冷 CCD 檢測技術，在約 40 分鐘內即可完成 384 個樣本的精準定量，廣泛應用于基因表達分析、病原體篩查及 SNP 分型等高通量場景。

技術架構與高通量優勢

該系統的核心在于將Therma-Base 熱循環技術與384 孔高密度模塊相結合。其加熱塊采用高導熱性銀質材料，配合半導體溫控，實現了極高的孔間溫度均一性（±0.1℃），徹底消除了傳統 PCR 的邊緣效應，無需依賴 ROX 被動參比染料即可獲得穩定數據。

“40 分鐘極速循環”是其核心賣點。384 孔模塊的最大升溫速率可達 4.8℃/s，配合優化的熱傳導設計，可在約 40 分鐘內完成 40 個循環的標準擴增，將單日檢測通量提升至萬級樣本水平。系統支持 5–20 µL? 的反應體系，有效節約珍貴試劑成本。

光學系統與檢測性能

LightCycler 480 II 采用高強度白光 LED 光源與冷卻型單色 CCD 相機的組合。光源覆蓋 430–630 nm 激發光譜，CCD 在低溫（約 10℃）下工作以降低暗電流噪聲，實現對整塊 384 孔板的同步激發與采集，避免了逐孔掃描的時間延遲。

該系統特別適合多重 PCR（Multiplex）? 檢測，其多通道光學設計允許在同一反應管內同時檢測多達 4–6 個靶標，結合高分辨率熔解曲線（HRM）功能，可進行精細的基因分型與突變掃描。

應用場景與操作維護

1. 生物制藥與基因表達

在藥物研發中，該平臺用于大規模篩選藥物處理后的基因表達變化（相對定量），其高效率校正算法（E-method）可準確計算低豐度基因的差異。

2. 臨床分子診斷與篩查

適用于新冠病毒、流感、HPV 等病原體的高通量核酸檢測。其 384 孔格式可直接對接自動化液體處理系統，構建全自動核酸檢測流水線。

3. 遺傳變異分析

利用其高分辨率熔解曲線（HRM）? 功能，無需特異性探針即可進行 SNP 分型、甲基化分析和微生物鑒定，顯著降低檢測成本。

操作與維護：儀器支持用戶自行更換 96 孔與 384 孔模塊，無需工程師現場校準。LED 光源壽命長達數萬小時，日常維護僅需保持模塊清潔。軟件系統支持 21 CFR Part 11 合規性設置，滿足 GLP 實驗室的審計要求。

搬遷與安裝建議

由于 LightCycler 480 II 為一體化精密光學儀器，搬遷前務必關閉電源并等待模塊冷卻至室溫。搬運過程中需固定儀器底座，避免劇烈震動導致光路偏移。安裝新場地后，建議使用標準定量模板進行性能驗證（如區分 1000 與 2000 拷貝的差異），并運行熔解曲線確認孔間溫度均一性。