武漢樞密腦科學技術有限公司
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克隆形成
平板克隆形成實驗
? ? ?克隆形成實驗檢測每一個細胞擴增為一個克隆的能力,是一種在體外條件下評估細胞生存能力和增殖能力的方法。
實驗步驟:
DAY1
? ? ? 制備單細胞懸液,加到六孔板,每組依次(100/200/400個細胞),每孔2mL培養基,培養過夜。
DAY2-3
? ? ??加藥處理48小時。
DAY4-?
? ? ? 培養2-3周直到形成克?。ㄕJ為超過50個細胞的群是一個克隆),每2-3天換一次液,拍照,計數。

? ? ? mitomycin C:屬烷化劑,為生物還原性抗生素,可與DNA發生交叉聯結,使DNA解聚,阻止DNA的復制過程。mitomycin C為細胞周期非特異性藥物,作用于G1、G2及M期,并對S/G2期有延緩作用。10μM絲裂霉素C (Mitomycin C)處理宮頸癌細胞系HeLa細胞,對照組添加等量DMSO,48小時后撤掉藥物,培養一段時間后,細胞形成克隆,比較兩組克隆數可知絲裂霉素C抑制了HeLa細胞增殖。
? ? ? 細胞克隆形成率即細胞接種存活率,表示接種細胞后貼壁的細胞成活并形成克隆的數量。貼壁后的細胞不一定每個都能增殖和形成克隆,而形成克隆的細胞是能夠貼壁并且有增殖活力的細胞??寺⌒纬陕史从臣毎后w依賴性和增殖能力。


平板克隆實驗檢測沉默RSF-1的乳腺癌細胞系MCF-7/SKBR3的增殖能力
(Oncol Lett. 2018 Oct; 16(4): 4279–4284.)
