單克隆抗體制備/多克隆抗體制備/蛋白表達純化

單克隆抗體制備

單克隆抗體（單抗）應用淋巴細胞雜交瘤技術將免疫動物的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合形成雜交瘤細胞，通過HAT篩選，ELISA抗體檢測，有限稀釋克隆化，選擇出具有分泌抗體功能又能無限繁殖的來源于單一B細胞的雜交瘤細胞，并產生抗體，就是單克隆抗體。單抗的最大優勢是它的特異性、均一性、高效性和無限供應性。在免疫學、醫學、生物學等領域的基礎研究和臨床醫學上，包括對疾病(包括癌癥)的診斷、預防和治療等方面，均顯示出巨大的生命力。

實驗步驟：

1. 每種抗原免疫5只Balb/c小鼠
2. 選取ELISA效價較高的小鼠，取脾細胞與SP2/0細胞融合
3. 進行2~4次克隆化及ELISA篩選，確保雜交瘤細胞分泌抗體的穩定性
4. 抗體亞類鑒定
5. 至少選擇2株雜交瘤細胞的凍存，并免費提供一年的保種服務

抗體的應用：制備的抗體可能用于ELISA、WB、IHC、IP等實驗。

客戶需提供的材料及信息:

• 客戶需要提供2mg以上的純化蛋白質，純度≥90%(SDS-PAGE檢測)，若帶融合標簽需說明并提供篩選蛋白
• 如為多肽，客戶要提供兩種偶聯不同蛋白質的多肽各4mg，未偶聯多肽1mg，偶聯多肽純度≥85%

結果提供：

實驗報告???????????????????

免疫前血清（20μl）????? ???

免疫后血清（20μl）

抗體上清（至少3株,1ml/株）???

雜交瘤細胞（3株）???????????

抗體亞型

如需要純化的客戶增加如下結果：

純化抗體（3株）(純度≥90％,濃度≥1mg/ml,每株5mg）?? 免疫效價?? 抗體親和力常數

相關說明：

A、免疫原可以為重組蛋白、天然蛋白、合成多肽、偶聯小分子等。

B、客戶需要承諾外的細胞株，每株價格為500元。

C、客戶需要對承諾外的細胞株抗體進行純化，價格為1500元/5mg（單獨報價為1800元）。

D、如客戶需要非IgG類的其他細胞株，每株價格500元，純化費用500元/5mg（CAAS法純化）

多克隆抗體制備

多克隆抗體存在于免疫動物的血清中，可通過直接分離血清獲得。由于具有可識別多個表位、可引起凝集反應、沉淀反應等優點，被廣泛應用于免疫學診斷領域。比如經常用到的Western blotting實驗中的酶標二抗和ELISA實驗中的包被抗體。而且制備費用也較單克隆抗體低。
我中心專業從事抗體生產和定制服務，您提供抗原，我們提供給您滿意的抗體產品；如果您只有半抗原，那么我們可以為您提供KLH或BSA的交聯服務，提高免疫應答水平，獲得高效價的抗體產品。

服務特色：
穩定的生產管理系統，保證成功率。如果最后沒有達到承諾的效價，不收取任何項目費用。如果為多肽項目，可以免費為客戶做序列分析及多肽選取。

應用：
制備的抗體可能用于ELISA、WB等實驗。

客戶需提供的材料及信息

1、客戶需要提供2mg以上的純化蛋白質，純度≥90%(SDS-PAGE檢測)，若帶融合標簽需說明并提供篩選蛋白。

2、如為多肽，客戶要提供兩種偶聯不同蛋白質的多肽各4mg，未偶聯多肽1mg，偶聯多肽純度≥85%。

蛋白表達純化

隨著蛋白藥物市場的快速發展和蛋白質組學研究的深入，高純度活性蛋白的需求越來越大。威斯騰生物中心組建了一支由多名具深厚生物技術基礎與制藥企業工作經驗的留學歸國人員和國內專家為核心的團隊?？蔀閲鴥韧饪蛻籼峁幕虻降鞍准兓恼准夹g服務。

威斯騰服務特色

穩定而多樣的表達系統：威斯騰生物已建立整套的基因克隆與表達體系，無論是單個基因的克隆、表達與純化，還是多個基因高通量的基因克隆、表達和純化，均能選用適合您試驗（科研項目）需要的表達系統和合適的表達載體為您提供優質的服務。

多種純化方式：可為客戶提供多種蛋白純化服務，純化方式包括親和層析純化、凝膠過濾、離子交換、疏水層析等，客戶可根據需要選擇合適的純化方式。

專業的團隊和良好的信息管理體系：專業的基因克隆、蛋白表達與純化技術人員與團隊，具有豐富的表達和純化經驗，可為客戶解決各種瓶頸問題, 良好信息管理體系使我們能夠為客戶提供成熟、高效的基因克隆服務。

操作流程

大腸桿菌和酵母蛋白表達系統：

合成基因（另外收費）或者客戶提供

SDS-PAGE檢測表達

Western blot檢測表達（可選）模板(cDNA、基因組DNA、質粒等)

構建表達載體

篩選陽性克隆

表達優化和可溶性分析

提供結果

１、構建的表達載體及測序報告

２、SDS-PAGE結果

３、篩選的表達菌株

４、Western blot結果

５、實驗流程及結果

６、2ml 1.0×108pfu/ml的病毒（利用昆蟲桿狀病毒蛋白表達系統表達時）

穩定表達細胞株（哺乳動物細胞）

威斯騰實驗服務流程

?

威斯騰生物服務項目