Beijing GENIA Biotechnology Co.,Ltd.

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Purchasermust determine the suitability of the product(s) for their particular use. Additional terms and conditions may apply.

Product Specification

Taq DNA 聚合酶

Taq DNA Polymerase

#SJ010/SJ050 500U/1000U

Store at -20℃

建議使用效期：1 YEAR

儲存條件：

-20℃保存1 年。

單位定義：

用活性化的大馬哈魚精子DNA 作為模板/ 引物，在

74℃，30 分鐘內，將10nmol 脫氧核苷酸摻入到酸性不

溶物質所需的酶量定義為1 個活性單位（U）。

濃度：5U/ul

產品描述：

Taq DNA Polymerase 是通過大腸桿菌表達純化的重組

酶。其基因來源于Thermus aquaticus polymerase。

該蛋白分子量為94 kDa，具有5′→ 3′DNA 聚合酶活

性和5′→ 3′外切核酸酶活性，無3′→ 5′外切核酸酶

活性，擴增得到的PCR 產物3′端附有一個“A”堿基，因

此可直接用于T/A 克隆。本產品具有延伸速度快、擴增

效率高的特點，主要適用于PCR 法擴增DNA 片段、DNA

序列測定等實驗。

應用舉例：

以下舉例為常規PCR 反應體系和反應條件，實際操作中

應根據模板、引物結構和目的片段大小不同進行相應的

改進和優化。

質量控制：

經過多次柱純化，SDS-PAGE 檢測其純度大于99%；

經檢測無外源核酸酶活性；PCR 方法檢測無宿主殘余

DNA；能有效地擴增人基因組中的單拷貝基因；室溫

存放一個月，無明顯活性改變。

試劑 50μl 體系終濃度

10×Taq PCR Buffer 5μl 1×

dNTP Mix，2.5 mM each 4μl 200μM each

Forward Primer，10μM 2μl 0.4μM

Reverse Primer，10μM 2μl 0.4μM

Template DNA <1μg <1μg/reaction

Taq DNA Polymerase，5U/μl 0.25μl

RNase-Free Water up to 50μl

注意：

1）引物濃度請以終濃度0.1-1.0μM 作為設定范圍的參

考。擴增效率不高的情況下，可提高引物的濃度；發生

非特異性反應時，可降低引物濃度，由此優化反應體系。

2）鎂離子濃度請以終濃度1.5-3mM 作為設定范圍的參

考。本產品的10×PCR Buffer 中不含鎂離子，單獨配

有25mM MgCl2，可根據不同的引物對和模板來調節鎂離

子濃度，由此優化反應體系。

1.PCR 反應體系

2.PCR 反應條件

步驟溫度時間

預變性 94℃ 2min

變性 94℃ 30s

退火 55-65℃ 30s

延伸 72℃ 30s

終延伸 72℃ 2min

25-35 個循環

注意：

1）一般實驗中退火溫度比擴增引物的熔解溫度Tm 低

5℃，無法得到理想的擴增效率時，適當降低退火溫度；

發生非特異性反應時，提高退火溫度，由此優化反應條

件。

2）延伸時間應根據所擴增片段大小設定，本產品Taq

DNA Polymerase 的擴增效率為1kb/30s。

3）可根據擴增產物的下游應用設定循環數。如果循環

次數太少，擴增量不足；如果循環次數太多，錯配機率

會增加，非特異性背景嚴重。所以在保證產物得率的前

提下應盡量減少循環次數。

3. 結果檢測：

反應結束后取5μl 反應產物，加入適量上樣緩沖液后，

進行瓊脂糖凝膠電泳檢測。

組分說明

Cat.No. SJ010 SJ050

Kit Size 500U 1000U

Taq DNA Polymerase,5U/μl 100μl 200μl

10×Taq PCR Buffer 1×1.5ml 2×1.5ml

25mM MgCl2 1×1.5ml 2×1.5ml

注意：

本產品的10×Taq PCR Buffer 不含有鎂離子，單

獨配有25mM MgCl2。

相關產品：

SJ060 dNTPs Mix(10mM Each)

PCR010 2×Taq PCR MasterMix ( 含染料） 1ml

PCR011 2×Taq PCR MasterMix ( 不含染料） 1ml

P1206 Pfu DNA 聚合酶

G1219 Genia 超保真DNA 聚合酶 200U

E010V PCR 增強劑 100ul

1ml

500U